[发明专利]一种马传染性贫血病毒p26-gp90重组蛋白及其制备方法和应用有效
申请号: | 202011474580.X | 申请日: | 2020-12-14 |
公开(公告)号: | CN112521462B | 公开(公告)日: | 2023-09-19 |
发明(设计)人: | 李晓光;何坚锋;王哲侃 | 申请(专利权)人: | 杭州爱谨生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/155 | 分类号: | C07K14/155;C12N15/49;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;G01N33/68;G01N33/569;G01N33/558;C12R1/19 |
代理公司: | 杭州信与义专利代理有限公司 33450 | 代理人: | 马育妙 |
地址: | 310004 浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种马 传染 性贫血 病毒 p26 gp90 重组 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
1. 一种马传染性贫血病毒p26-gp90重组蛋白,其特征在于,由SEQ ID NO. 1所示氨基酸序列组成。
2. 一种编码权利要求1所述重组蛋白的基因,其特征在于,包括SEQ ID NO. 2所示核苷酸序列。
3.一种表达载体,其特征在于,包括权利要求2所述基因。
4.一种宿主细胞,其特征在于,含有权利要求3所述表达载体。
5.一种制备权利要求1所述重组蛋白的方法,其特征在于,包括诱导权利要求4所述宿主细胞进行蛋白表达的步骤。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述表达载体为pET30a,所述宿主细胞为大肠杆菌。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,诱导宿主细胞进行蛋白表达的步骤为:
S1,用含50μg/mL卡那霉素的LB培养基37℃培养所述大肠杆菌,
S2,当大肠杆菌培养液OD600至0.5-0.7时,用终浓度为1mM的IPTG进行诱导表达,诱导条件为:25℃,转速200rpm,4h;
S3,将培养液于4℃,7000rpm离心10min,收集菌体;
S4,用缓冲液Binding Buffer破碎菌体;
S5,超声破碎菌体,条件为:550w,超声2s,间隔5s,共80-120次;
S6,4℃,12000rpm离心30min收集上清,所述重组蛋白在上清中。
8.权利要求1所述的重组蛋白在制备用于检测马传染性贫血病毒抗体的试剂盒中的应用。
9.一种用于检测马传染性贫血病毒抗体的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1所述的重组蛋白。
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