[发明专利]精子质膜保护剂HEPES/BSA及染色液和染色方法在审
| 申请号： | 202011476061.7 | 申请日： | 2020-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN112649268A | 公开（公告）日： | 2021-04-13 |
| 发明（设计）人： | 曾长军;王艺涵;邓思维;王文灿 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | G01N1/30 | 分类号： | G01N1/30 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 赵浩竹 |
| 地址： | 611130 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 精子 质膜 保护 hepes bsa 染色 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种精子质膜保护剂HEPES/BSA，其特征在于，该保护剂HEPES/BSA包含：4-羟乙基哌嗪乙磺酸、牛血清白蛋白、D-果糖、氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁和水；其中，所述4-羟乙基哌嗪乙磺酸、牛血清白蛋白、D-果糖、氯化钠、氯化钾、氯化钙和氯化镁的浓度分别为10mmol·L-1、1g·L-1、14mmol·L-1、130mmol·L-1、4mmol·L-1、1mmol·L-1、0.5mmol·L-1。
2.一种稳定高效检测精子活率的染色液，其特征在于，该染色液包含：台盼蓝和如权利要求1所述的精子质膜保护剂HEPES/BSA；其中，所述台盼蓝的浓度为0.4～0.8％。
3.根据权利要求2所述的染色液，其特征在于，所述台盼蓝和HEPES/BSA保护液用量比为1～2g：125mL。
4.一种稳定高效检测精子活率的方法，其特征在于，该方法采用如权利要求2或3所述的染色液对待检测的精子样品进行染色。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，该方法包含：将待检测精子样品与所述染色液以体积比1：1混合，于37℃或室温下染色，染色结束后取溶液涂在载玻片上，在显微镜下观察拍照，统计死亡精子数和总精子数，求出精子活率。
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