[发明专利]一种食物中的诺氟沙星残留酶联免疫检测试纸盒的制备

说明书

本发明属于诺氟沙星残留酶联免疫检测领域，公开了一种食物中的诺氟沙星残留酶联免疫检测试纸盒的制备，所述试纸盒包括酶标板、诺氟沙星标准品、诺氟沙星抗体工作液、诺氟沙星酶标二抗工作液、底物液A、底物液B、终止液、浓缩稀释液和浓缩洗涤液；所述酶标板的制备方法包括以下步骤：一、包被抗原；二、包被液；三、酶标板包被；所述诺氟沙星抗体工作液的制备方法包括以下步骤：1)单克隆抗体；2)一抗工作液；3)二抗工作液。本发明，通过酶催化显色剂显色，根据显色的深浅来判断样品中诺氟沙星的含量，如果样品中的诺氟沙星含量少，显色深；反之，则显色浅，检测方法操作简便，检测灵敏、准确、快速，适用于大批量样品的快速检测。

技术领域

本发明涉及诺氟沙星残留酶联免疫检测技术领域，具体为一种食物中的诺氟沙星残留酶联免疫检测试纸盒的制备。

背景技术

诺氟沙星(norfloxacin,NFLX)是第三代诺氟沙星药物,具有抗菌谱广、作用迅速、组织穿透力强、价格低廉等优点,广泛用于禽兽及水产养殖疾病的治疗和预防。其抑菌机制主要是抑制细菌拓扑异构酶IV和DNA螺旋酶活性,从而阻碍细菌DNA复制、转录、修复和重组。诺氟沙星具有一定的毒副作用,长期摄入含有诺氟沙星的动物源食品,会导致抗生素在人体内残留蓄积,使人体产生耐药性并影响人体健康,严重时会对食用者产生直接毒性及潜在“三致”作用(致癌、致畸、致突变)。目前检测诺氟沙星的方法主要有酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、毛细管电泳法(capillaryelectrophoresis,CE)、液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)、液相质谱法(mass spectrometry,MS)、液相色谱串联质谱法(liquid chrometography-mass spectrometry,LC-MS)-、化学发光免疫测定法(chemiluminescent enzymeimmunoassay assay,CLIA)等。

虽然目前检测方法很多,但是难以在保证快速、高效的同时实现成本最低化。毛细管电泳法灵敏度较低、选择性较差；MS、LC-MS方法操作步骤繁琐,需要贵重仪器,一般在对阳性结果做出准确判断时使用HPLC法检测结果稳定,灵敏度较高,但由于方法和仪器自身的限制,检出限难以进一步降低,且前处理过程比较繁琐；管式化学发光免疫测定法是化学发光免疫测定法中的一种,它是以磁性微粒为固相载体,基于抗原抗体特异性反应的一种免疫分析方法,但是成本比较高，故而提出了一种食物中的诺氟沙星残留酶联免疫检测试纸盒的制备来解决上述问题。

发明内容

(一)解决的技术问题

1.要解决的技术问题

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种食物中的诺氟沙星残留酶联免疫检测试纸盒的制备，具备灵敏度高、反应迅速与测试成本低的优点，解决了现有的检测方法难以在保证快速、高效的同时实现成本最低化的问题。

(二)技术方案

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种食物中的诺氟沙星残留酶联免疫检测试纸盒的制备，所述试纸盒包括酶标板、诺氟沙星标准品、诺氟沙星抗体工作液、诺氟沙星酶标二抗工作液、底物液A、底物液B、终止液、浓缩稀释液和浓缩洗涤液；

所述酶标板的制备方法包括以下步骤：

一、包被抗原；

二、包被液；

三、酶标板包被；

所述诺氟沙星抗体工作液的制备方法包括以下步骤：

1)单克隆抗体；

2)一抗工作液；

3)二抗工作液。

优选的，所述包被抗原制备包括以下步骤：