[发明专利]一种燕麦多肽亚铁螯合物的制备方法

权利要求书

1.一种燕麦多肽亚铁螯合物的制备方法，其特征在于：其是以燕麦蛋白酶解液为基料，经过超滤、冻干、螯合、醇析并冻干，得到燕麦多肽亚铁螯合物，具体包括以下步骤：

S1、燕麦多肽的获得：以燕麦为原料，采用碱溶酸沉的方法得到燕麦蛋白，用碱性蛋白酶对其进行酶解，将得到的酶解液通过超滤膜进行超滤，收集滤液、冻干得到一定分子量的燕麦多肽；

S2、燕麦多肽亚铁螯合物的制备：配制一定浓度的燕麦多肽溶液，按一定比例加入无机铁盐，调节PH，在一定温度下进行水浴加热；

S3、醇析：反应结束后，离心取上清液，加入一定比例的95％乙醇溶液，静置一段时间后，离心取沉淀，冻干后得燕麦多肽亚铁螯合物粉末，测定其螯合率。

2.根据权利要求1所述的一种燕麦多肽亚铁螯合物的制备方法，其特征在于：所述步骤S1中，选用的膜为3KDa的超滤膜，收集的即为＜3KDa的肽段，且步骤S1中，干燥方法为真空冷冻干燥；收集的粉末状燕麦多肽在-20℃储藏备用。

3.根据权利要求1所述的一种燕麦多肽亚铁螯合物的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中，使用超纯水将多肽配制为质量浓度2％-6％的多肽溶液，加入0.2g抗坏血酸防止亚铁离子氧化,且步骤S2中，无机铁盐选用四水氯化亚铁进行螯合。

4.根据权利要求1所述的一种燕麦多肽亚铁螯合物的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中，螯合条件为：待温度达到20-60℃时，按照肽铁质量比为2：1-6：1进行混合，用1mol/L的HCl或1mol/L的NaOH调节溶液PH至3-7，恒温水浴10-50min。

5.根据权利要求1所述的一种燕麦多肽亚铁螯合物的制备方法，其特征在于：所述步骤S3中，螯合反应完成，冷却后4000r/min离心10min，且步骤S3中，以95％乙醇：样液＝6：1向上清液中加入95％乙醇溶液，静置时间为1h。

6.根据权利要求1所述的一种燕麦多肽亚铁螯合物的制备方法，其特征在于：所述步骤S3中，第二次离心条件：8000r/min离心10min，且步骤S3中，干燥方法为真空冷冻干燥法，收集的燕麦多肽亚铁螯合物在-20℃储藏备用，所述步骤S3中，螯合率的测定方法为：采用邻非罗琳法测定铁含量，从而计算螯合率。

7.一种燕麦多肽亚铁螯合物制备的优化方法，其特征在于：在所述权利要求1-6任意一项燕麦多肽亚铁螯合物的制备方法的基础上，首先进行5个单因素优化，然后采用响应面优化法进行优化。

8.根据权利要求7所述的一种燕麦多肽亚铁螯合物制备的优化方法，其特征在于：其优化方法是以螯合率为指标，且5个单因素分别为肽铁质量比(2：1-6：1)、PH(3-7)、多肽浓度(2％-6％)、温度(20-60℃)、时间(10-50min)。

9.根据权利要求7所述的一种燕麦多肽亚铁螯合物制备的优化方法，其特征在于：其最终优化条件为在多肽浓度为3％、肽铁质量比为4：1下加入无机铁盐，调节PH至6，在40℃恒温水浴螯合反应20min，螯合率达到57.7％。

10.根据权利要求7所述的一种燕麦多肽亚铁螯合物制备的优化方法，其特征在于：其采用响应面优化法，最终螯合率达到63％。