[发明专利]一种生物胺检测方法、试剂盒及其应用

说明书

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种生物胺检测方法、试剂盒及其应用。其中，生物胺检测方法，包括以下步骤：(1)将多巴胺溶液添加至巯基聚乙二醇修饰的金纳米颗粒溶液，得到检测溶液；(2)将待测样品溶液加入检测溶液反应，目标反应时间后通过溶液的颜色变化，比对溶液颜色与生物胺含量之间的标准对应关系，得到待测样品的生物胺含量。本发明利用聚多巴胺的强粘附特性，通过生物胺含量影响聚多巴胺在金纳米颗粒表面的形成，影响金纳米颗粒的局域表面等离子体共振，最终影响金纳米颗粒溶液颜色的变化，以此得到生物胺的含量。

技术领域

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种生物胺检测方法、试剂盒及其应用。

背景技术

生物胺(biogenic amine，BA)是一类低分子量的含氮有机化合物，通常含有脂肪族、芳香族、杂环等结构。食品中常见的生物胺主要有组胺、腐胺、尸胺、精胺、亚精胺、酪胺、苯乙胺及色胺等。生物胺是氨基酸脱羧酶对氨基酸脱羧后形成的产物，被认为与食品的腐败密切相关，其含量通常作为指示食品腐败变质的新鲜度指标。过量摄入生物胺会导致身体不适，引发呼吸紊乱、心悸等反应，严重时会危及生命。目前，生物胺的检测方法主要为高效液相色谱、气相色谱等，这些方法具有分离效能高、操作简便、检测灵敏度好、对样品适用范围广等优点，但存在着诸如设备昂贵、样品前处理繁琐等局限性。因此有必要建立一种快速、准确、灵敏的检测方法。

近年来，纳米颗粒以其独特的理化性质受到广泛关注。其中，纳米金粒子(AuNP)是纳米直径的金颗粒，尺寸一般在1-100nm，具有高电子密度、介电特性及催化作用。金纳米颗粒具有表面增强拉曼散射、能量共振转移和局域表面等离子共振等光学特性。因此，金纳米颗粒广泛应用于各个领域，如有害物检测，颜色指示剂及生物探针等。例如，公开号为CN104148626B的专利文献公开了一种杯芳烃功能化金纳米颗粒及其制备方法，通过金-巯键将杯芳烃CEC4修饰到金纳米颗粒表面，CEC4功能化金纳米颗粒在生物胺的检测中有很强的特异性，利用新型CEC4功能化金纳米颗粒的这一重要特性，构建的生物胺比色传感器为生物样品中生物胺含量的检测提供了更为便捷的方法，其原理主要依赖于CEC4与氨基的结合，导致金纳米颗粒的聚集，而该类型的聚集易受到动力学的影响，环境条件如温度、浓度等的微小改变有可能对检测结果的影响较大，造成检测结果的偏差；而且，易受到食物中如核酸、氨基酸等带有氨基的物质影响，发生非预期的聚集，特异性差。另外，其对于缺乏足够烷基链长的尸胺和腐胺不能引起CEC4功能化金纳米颗粒的聚集反应，无法实现检测，普适性一般。

多巴胺(Dopamine，DA)在特定条件下可以发生氧化自聚，形成聚多巴胺(Polydopamine，PDA)，且其聚合速率受到氧气浓度、酸碱度的影响。2007年，Messersmith课题组报道了PDA具有广谱粘附性，可作为外壳包裹在几乎任何固体材料表面，故被广泛应用于如涂层、表面修饰、纳米材料功能化等领域。

发明内容

基于现有技术中存在的上述缺点和不足，本发明的目的之一是至少解决现有技术中存在的上述问题之一或多个，换言之，本发明的目的之一是提供满足前述需求之一或多个的一种生物胺检测方法、试剂盒及其应用。

为了达到上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

一种生物胺检测方法，包括以下步骤：

(1)将多巴胺溶液添加至巯基聚乙二醇修饰的金纳米颗粒溶液，得到检测溶液；

(2)将待测样品溶液加入检测溶液反应，目标反应时间后通过溶液的颜色变化，比对溶液颜色与生物胺含量之间的标准对应关系，得到待测样品的生物胺含量。

本发明的检测原理为：利用金纳米颗粒表面形成的聚多巴胺涂层厚度，直接影响金纳米颗粒的直径，进一步影响金纳米颗粒的局域表面等离子共振，聚多巴胺聚合速率主要受到酸碱度的影响，温度微小的变化对其几乎无影响，检测的稳定性更佳。