[发明专利]高持久性的驱蚊生物制剂及制备方法

说明书

本发明涉及生物灭蚊农药技术领域，特别涉及高持久性的驱蚊生物制剂及制备方法；苏云金杆菌以色列亚种原菌在斜面种子培养基中进行种子培养，随后将种子接入种子罐的发酵培养基中进行种子培养，所述斜面种子培养基包括牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、琼脂和去离子水，所述牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、琼脂和去离子水的质量比为0.5～1：1～2：0.5～1：0.5～1：3～4：400～500，所述发酵培养基由以下重量百分比的各原料制得：玉米淀粉2～2.5％、蛋白胨0.2～0.4％、酵母粉0.1～0.2％、豆粕粉2.2～3.0％、玉米浆1.0～1.5％、磷酸二氢钾0.05～0.1％、硫酸镁0.01～0.03％、氯化钙0.1～0.2％、硫酸锰0.003～0.005％和去离子水92.065～94.337％。本发明的驱蚊生物制剂的持续时间长，产品稳定性高。

技术领域

本发明涉及生物灭蚊农药技术领域，特别涉及高持久性的驱蚊生物制剂及制备方法。

背景技术

蚊子是传播人类疾病的重要媒介昆虫之一。灭蚊剂的发展经历了矿物油、植物粉和化学杀虫剂到微生物灭蚊剂等阶段。幼虫时期是防治蚊虫的关键时期。苏云金芽孢杆菌以色列亚种(Bacillus thuring iensis subsp.israelensis，简称Bti)以其对蚊科幼虫高毒，且高效安全、易于分解、低残留、与环境相容的特性，成为被广泛关注的新的灭蚊剂的代表。Bti是Goldberg和Margalit于1977年发现的一种对蚊科幼龄害虫具有高度毒力的病原细菌。自发现以来，人们利用Bti制剂为控制蚊媒病的传播做出了大量工作。然而，现有剂型持效期短，限制了Bti的更大规模的应用，通过改进制剂的持效性可以减少使用次数和防治成本，因此，研究开发有缓释作用持效期长的Bti剂型具有重要意义。

为此，提出高持久性的驱蚊生物制剂及制备方法。

发明内容

本发明的目的在于提供高持久性的驱蚊生物制剂及制备方法，该驱蚊生物制剂的持续时间长，产品稳定性高。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：

高持久性的驱蚊生物制剂，苏云金杆菌以色列亚种原菌在斜面种子培养基中进行种子培养，随后将种子接入种子罐的发酵培养基中进行种子培养，所述斜面种子培养基包括牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、琼脂和去离子水，所述牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、琼脂和去离子水的质量比为0.5～1：1～2：0.5～1：0.5～1：3～4：400～500，所述发酵培养基由以下重量百分比的各原料制得：玉米淀粉2～2.5％、蛋白胨0.2～0.4％、酵母粉0.1～0.2％、豆粕粉2.2～3.0％、玉米浆1.0～1.5％、磷酸二氢钾0.05～0.1％、硫酸镁0.01～0.03％、氯化钙0.1～0.2％、硫酸锰0.003～0.005％和去离子水92.065～94.337％，其中，所述苏云金杆菌以色列亚种原菌的添加量为1-2支斜面种子/T，所述发酵种子的添加量为1kg/T。

具体的，所述牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、琼脂和去离子水的质量比为1：2：1：1：4：500。

具体的，所述发酵培养基由以下重量百分比的各原料制得：玉米淀粉2.5％、蛋白胨0.4％、酵母粉0.2％、豆粕粉3.0％、玉米浆1.5％、磷酸二氢钾0.1％、硫酸镁0.03％、氯化钙0.2％、硫酸锰0.005％和去离子水92.065％。

高持久性的驱蚊生物制剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)发酵种子的斜面种子培养基制备，按配比称取相应的原料组分，将牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、琼脂和去离子水分别置于种子罐中，添加苏云金杆菌以色列亚种原菌，在PH7.0～7.2以及培养温度为32℃的条件下培养4～5d，得到种子A；

(2)发酵培养基的制备，按配比称取相应的原料组分，将玉米淀粉、蛋白胨、酵母粉、豆粕粉、玉米浆、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、硫酸锰和去离子水分别置于种子罐中，在PH 7.5～7.8以及121℃的条件下灭菌30min，备用，得到发酵培养基B；