[发明专利]一种基于表面增强拉曼光谱检测血清钾离子的方法

说明书

本发明公开了一种基于表面增强拉曼光谱检测血清钾离子的方法，包括：取待测样本用去离子水进行稀释，得到稀释后的待测样本；取0.3mL稀释后的待测样本置于样品管中，向其中加入质量分数为0.2‑1％的四苯硼钠水溶液，振荡混匀，静置反应后离心，倒去上层清液；向样品管中加入0.5‑1mL去离子水振荡混匀，离心后倒去上清液，重复执行一次；向样品管中加入0.5‑1mL浓度为0.05‑0.5mol/L稀盐酸水溶液，振荡混匀，静置，得到待测液；取纳米金溶胶和待测液进行混合，得到混合液；对混合液进行拉曼光谱检测，得到的拉曼光谱曲线，将该拉曼光谱曲线与钾离子拉曼光谱工作曲线进行比对，以确定待测样本中钾离子浓度。

技术领域

本发明属于分析测试技术领域，具体涉及一种基于表面增强拉曼光谱检测血清钾离子的方法。

背景技术

钾是维持细胞生理活动的主要阳离子，在保持机体的正常渗透压及酸碱平衡、参与糖及蛋白代谢、保证神经肌肉的正常功能等方面具有重要作用。正常的血清钾浓度为3.5-5.5mmol/L，低钾症(低于3.5mmol/L)和高钾症(高于5.5mmol/L)都会给身体带来极大危害。低钾症主要危害消化系统、神经肌肉系统以及肾功能；高钾症主要造成心脏功能损伤，容易导致心脏骤停，同时影响骨骼和消化系统。目前临床检测血钾的方法主要有火焰光度法，离子选择电极法(ISE)，干化学法和分光光度法几种：

火焰光度法的基本原理是：当血清样本经雾化装置化为细雾送入火焰中燃烧时，由于K⁺得到能量后，发射出特殊波长的光谱，光通过滤光片，被光检测器接收。通过光电系统对辐射光能的测量，已知高、低值的各分析物来校准，就可求得钾含量；火焰光度法存在主要问题是灵敏度受影响因素多(包括燃气压力、助燃气的压力、标本进样速度影响，标本加入蒸馏水后要充分混匀等)，以及所使用的燃气丙烷具有高危险性，对检测实验室和人员造成安全隐患。

离子选择性电极法是以测量电池的电位为基础的定量分析方法。由K⁺活度的作用而使离子选择性电极产生不同的电位，其活度与离子浓度成正比，故离子选择性电极法可定量分析标本中钾离子浓度；离子选择电极法(ISE)存在主要问题仪器需要不断定标，电极需半年更换一次，维护费用高，并且配套检测试剂成本高。

干化学法所使用干化学载片采用高精度彩色波拉制造工艺，将高纯度化学试剂用明胶结合剂涂在载片上。化学载片上含有K⁺试验的磁性密码，电子计算机将测量结果转换成浓度显示出来；干化学方法所使用的的多层膜测试干片是一次性使用，检测成本很高，尚不能广泛应用到临床常规检测中。

分光光度法主要基于大环发色团法和酶法，采用相关物质与K⁺特定显色的原理，通过测定吸光度值的原理定量检测K⁺浓度。分光光度法中大环发色团法无法避免胆红素的干扰，而酶法试剂昂贵，检测成本高，而且受影响因素较多。

综上，上述几类方法普遍存在检测时间长，方法检测的专业要求高，试剂检测成本高等缺点。

发明内容

发明目的：为解决现有技术中存在的问题，本发明提出了一种基于表面增强拉曼光谱检测血清钾离子的方法，借助拉曼光谱原理可从分子层面精准判断样品中是否存在钾离子。

本发明所采用的技术方案是：一种基于表面增强拉曼光谱检测血清钾离子的方法，包括以下步骤：

S100：取待测样本用去离子水进行n倍数稀释，n＝1,2,3…，得到稀释后的待测样本；

S200：取稀释后的待测样本置于样品管中，向其中加入质量分数为0.2-1％的四苯硼钠水溶液，振荡混匀，静置反应后离心，倒去上层清液；待测样本与四苯硼钠水溶液的体积比为：(12-18)：1；

S300：向样品管中加入0.5-1mL去离子水振荡混匀，离心后倒去上清液；

S400：重复执行S300一次；