[发明专利]多重荧光PCR法技术筛查嗜酸性粒细胞增多相关融合基因的方法、引物及探针和组合物在审
申请号: | 202011498932.5 | 申请日: | 2020-12-17 |
公开(公告)号: | CN112608997A | 公开(公告)日: | 2021-04-06 |
发明(设计)人: | 张辰;邹媛;杜翠;董越 | 申请(专利权)人: | 武汉艾迪康医学检验所有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 | 代理人: | 黄素萍 |
地址: | 430000 湖北省武汉市江汉区*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 多重 荧光 pcr 技术 筛查嗜 酸性 粒细胞 增多 相关 融合 基因 方法 引物 探针 组合 | ||
1.多重荧光PCR技术筛查FIP1L1-PDGFRa、ETV6-PDGFRβ,ETV6-ABL、PCM1-JAK2、BCR-FGFR1、ZNF198-FGFR1共6种嗜酸性粒细胞增多相关融合基因,其特征在于,所述引物和探针的核苷酸序列如下:
FIP1L1-9F:GCAGAGATCCAAGATGGCAGAT
FIP1L1-10F:TTGTTCAAGACTGGGCTTCCA
FIP1L1-11F:ATATGGGAGGGCCGAATCA
FIP1L1-12F:GGGCAAATGAGAACAGCAACA
FIP1L1-13F:ACTGCTCCACCTCTGATTCCA
PDGFRα-R:CAAGACCCGACCAAGCACTAGT
PDGFRα-P:FAM-CTGCCTTATGACTCAAGATGGGAGTTTCCAA-TAMRA
PDGFRβ-R:TGTACTCATGGCCGTCAGAG
PDGFRβ-P:FAM-CTCAATCACCTTCCATCGGATCTCGTAAC-TAMRA
ETV6-A4F:CCACCCTGGAAACTCTATACACAC
ETV6-A5F:CTCTGTCTCCCCGCCTGAA
T-ABL-R:TCCAACGAGCGGCTTCAC
T-ABL-P:FAM–TCAGCGGCCAGTAGCATCTGACTT-TAMRA
PCM-26F:TGAGAGCCTTGCTACTACTGATG
PCM-36F:GGCTGGAAGTCCTGATACTGA
JAK2-9R:AGAGGTAATGATGTGCATCTGC
JAK2-9P:FAM–CAAAGCTTCCCTTAATGAGCTAAGTTCAATTTC-TAMRA
JAK2-11R:CGAACAGTTTCCATCTGGTAAC
JAK2-11P:FAM-TGAGAATGAAGAGTACAACCTCAGTGGGACA-TAMRA
BCR-4F:GGGCGACCTCTTCCAGAA
ZNF198-17F:GCCTGTGTATATCCCAGTTCC
FGFR1-10R:GAACCAGAAGAACCCCAGAG
FGFR1-10P:FAM-TCTGCTGACTCCAGTGCATCCATGAA-TAMRA。
2.根据权利要求1所述的引物和探针,其特征在于,
用于PDGFRa基因检测引物和探针的核苷酸序列是:FIP1L1-9F,FIP1L1-10F,FIP1L1-11F,FIP1L1-12F,FIP1L1-13F,PDGFRα-R,PDGFRα-P;
用于ETV6基因检测引物和探针的核苷酸序列是:PDGFRβ-R,PDGFRβ-P,ETV6-A4F,ETV6-A5F,T-ABL-R,T-ABL-P;
用于JAK2基因检测引物和探针的核苷酸序列是:PCM-26F,PCM-36F,JAK2-9R,JAK2-9P,JAK2-11R,JAK2-11P;
用于FGFR1基因检测引物和探针的核苷酸序列是:BCR-4F,ZNF198-17F,FGFR1-10R,FGFR1-10P。
3.根据权利要求1或2所述的引物和探针,其特征在于,还包括扩增作为内参的管家基因
ABL的引物和探针,其核苷酸序列如下:
ABL1-F:GATACGAAGGGAGGGTGTACCA
ABL1-R:CTCGGCCAGGGTGTTGAA
ABL1-P:FAM-TGCTTCTGATGGCAAGCTCTACGTCTCCT-TAMRA。
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