[发明专利]一种胶体金间接标记、封闭的方法有效
申请号: | 202011504889.9 | 申请日: | 2020-12-18 |
公开(公告)号: | CN112649599B | 公开(公告)日: | 2022-08-16 |
发明(设计)人: | 付清山;王米格;刘丽君;李静辉;于林;刘功成;渠海;付光宇;吴学炜 | 申请(专利权)人: | 郑州安图生物工程股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/532 | 分类号: | G01N33/532;G01N33/543 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 王欢 |
地址: | 450000 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胶体 间接 标记 封闭 方法 | ||
1.一种胶体金间接标记、封闭的方法,其特征在于,包括:
步骤1:获得包被有第一偶联物的胶体金颗粒,然后加入第一封闭液封闭,得复合物1;
步骤2:向胶体金-第一偶联物-第一封闭剂复合物中加入第二封闭液封闭,得复合物2;
步骤3:向复合物2中加入第二偶联物,获得胶体金蛋白偶联物;
所述第一封闭剂液由第一封闭剂和缓冲液组成;
所述第二封闭剂液由第二封闭剂和缓冲液组成;
所述第一封闭剂和第二封闭剂依次为BSA、甘氨酸,或
所述第一封闭剂和第二封闭剂依次为PEG6000、组氨酸,
所述第一封闭剂和第二封闭剂依次为Casein、精氨酸;
所述第一封闭液中第一封闭剂的质量百分含量为0.1-2%;所述第二封闭液中第二封闭剂的质量百分含量为0.1-2%;
所述第一偶联物选自his标签抗体、Flag标签抗体、C-Myc标签抗体、HA标签抗体和GST标签抗体中的一种;
所述第二偶联物为标签标记的待测蛋白,所述第二偶联物的标签与所述第一偶联物结合,所述标签选自his标签、Flag标签、C-Myc标签、HA标签、GST标签中的一种。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述第一封闭剂为BSA;
所述第二封闭剂为甘氨酸。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述第一封闭液、第二封闭液中的缓冲液选自PBS、Tris-HCL、CB、HEPES中的一种或多种。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述第一封闭液、第二封闭液中的缓冲液的pH为7.5。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述第一封闭液为包含0.1-2wt%BSA的PBS缓冲液,第二封闭液为0.1-2 wt%甘氨酸的PBS缓冲液。
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