[发明专利]一种RNA聚合酶突变体及其应用有效
申请号: | 202011508966.8 | 申请日: | 2020-12-18 |
公开(公告)号: | CN112608911B | 公开(公告)日: | 2022-07-05 |
发明(设计)人: | 徐佳琪;蒋宇;陶荣盛;杨立荣;杨晟 | 申请(专利权)人: | 湖州中科工业生物技术中心 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/74;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/63;C12R1/19 |
代理公司: | 上海申浩律师事务所 31280 | 代理人: | 贾师英 |
地址: | 313000 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 rna 聚合 突变体 及其 应用 | ||
1.一种RNA聚合酶突变体,其为细菌RNA聚合酶β’亚基rpoC发生第457位酪氨酸突变所形成的突变体,其中RNA聚合酶β’亚基rpoC的氨基酸序列为SEQ ID NO:1,所述酪氨酸突变是酪氨酸突变为选自下组的氨基酸:组氨酸、亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸或者丝氨酸,从而使RNA聚合酶β’亚基rpoC成为RNA聚合酶β’亚基rpoC突变体。
2.编码如权利要求1中所述RNA聚合酶突变体的基因。
3.包含如权利要求2中所述基因的质粒,该质粒用于在细菌中表达所述RNA聚合酶突变体。
4.如权利要求3所述的质粒,其特征在于,所述细菌是需钠弧菌或者大肠杆菌。
5.一种细菌工程菌,其特征在于,宿主基因组中RNA聚合酶突变体的基因突变为如权利要求2中所述的RNA聚合酶突变体的基因;或者
宿主基因组中整合了如权利要求2中所述的RNA聚合酶突变体的基因。
6.如权利要求5所述的细菌工程菌,所述细菌是需钠弧菌或者大肠杆菌。
7.一种构建如权利要求5或6所述细菌工程菌的方法,其特征在于,采用质粒转化、同源重组技术或者基因编辑技术对细菌基因组实施基因改造。
8.如权利要求5或6所述的细菌工程菌在表达重组蛋白质中的应用。
9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,构建包含T7RNA聚合酶编码基因和所述重组蛋白质的编码基因的质粒,将该重组质粒转化入如权利要求5或6所述的细菌工程菌中,用于表达所述重组蛋白质。
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