[发明专利]新生儿胆道闭锁诊断标志物的应用

说明书

本发明公开了新生儿胆道闭锁诊断标志物在制备评估和诊断新生儿胆道闭锁的工具中的应用。所述诊断产品可以为医疗器械、试剂盒、试纸和医疗装置等。本发明还提供了检测所述生物标志物的试剂盒及其使用方法。本发明提供了新生儿胆道闭锁风险早期筛查和区别于其他原因导致的胆汁瘀积的诊断的有效手段，提高了新生儿胆道闭锁诊断效率和诊断准确性，为及时采取治疗措施争取时间，有利于提高新生儿胆道闭锁的治疗效果和预后。

技术领域

本发明涉及生物医疗技术领域，具体涉及可用于评估新生儿胆道闭锁风险的诊断标志 物及其在监测、筛查和诊断新生儿胆道闭锁领域的应用，本发明还涉及检测所述诊断标志物的 方法和装置。

背景技术

胆道闭锁(Biliary atresia，BA)新生儿期发生的进行性、特发性肝外胆管系统疾病，是一 种破坏性的新生儿胆管炎症纤维阻塞，影响着不同长度的肝内和肝外胆管，是新生儿阻塞性黄 疸最主要原因，也是小儿肝移植最主要原因，约60％儿童肝移植是由此引起的。诊断为先天性 胆道闭锁的患儿，如不得到及时治疗，80％以上将在1岁以内因肝功能衰竭而死亡。许多患儿 往往在确诊胆道闭锁时即已存在严重的肝脏纤维化，并且很快发展成为肝硬化，最终导致肝功 能衰竭。因此，胆道闭锁的尽早诊断就愈发显得迫切。肝门空肠吻合术(Kasai根治术)是胆 道闭锁的首选治疗方案。手术时间对于Kasai手术的疗效有很大影响。研究发现，在出生后 30或45天内进行Kasai手术，其术后黄疸消失率和五年的自体肝生存率显著升高，对肝移植 的需求显著降低。但不幸的是目前胆道闭锁不能及时诊断，一般手术的时间都到了2个月后。 胆道闭锁的早期筛查和诊断对患者意义重大，可节省患者宝贵的治疗时间并提高预后。目前临 床常用的术前诊断方法包括肝活检、胰胆管造影、肝胆造影和十二指肠管检查等。但这些技 术存在一定局限性。影像学检查中，异常胆囊(胆囊缩小，收缩差)和肝门部纤维块是超声检查 胆道闭锁患儿肝脏的特征性表现[Ta等。利用肝门纤维块及胆囊长度诊断胆道闭锁。儿科影像 学，2000,30(2):69-73]，但肝门部纤维块不一定在每个患儿中均出现，并且超声检查因不同 医生、机器等观察结果差异较大。因此文献中报道诊断胆道闭锁的敏感性与特异性各不相同。 近期，有Meta分析报道，胆囊闭锁和肝门部纤维块的特异性均可达到99％，然而相对应的敏 感性为28％和80％。

3个月龄以内的婴儿胆管直径小、胆管内液体少，磁共振胰胆管成像检查诊断胆道闭 锁的高假阳性率不可避免。此外，胆道闭锁的病理特征为小胆管增生、胆栓形成、毛细胆管和 肝细胞胆汁淤积、汇管区或小叶周围纤维化，早期尚可见肝小叶结构。因此，临床应用于鉴别 胆道闭锁与其他新生儿胆汁淤积症时，因检测准确性低或过程复杂导致胆道闭锁诊断和治疗的 延迟。在疾病早期，BA的临床表现、生物化学指标、影像学和组织学特征与其它胆汁淤积疾 病存在重叠性，鉴别诊断过程曲折、复杂且费用高昂，容易导致诊断延迟和增加了患者家庭的 经济负担。肝活检和十二指肠管检查将涉及不必要的手术，并给疑似患儿带来额外伤害。因此 探索简单、特异性诊断方法从未停止，探索简单有效的诊断生物标志物对胆道闭锁的早期筛查 和诊断具有重要意义。

现有的胆道闭锁筛查和诊断血清学指标包括：①血清总胆红素，直接胆红素；其作为最初筛查 指标。新生儿血清总胆红素2.0mg/dL(42–51μmol/L)，或直接胆红素1.0mg/dL(17μmol/L) 需进行胆道闭锁排查，但对于诊断胆道闭锁特异性差；②GGT：大样本调查研究表明，不同年 龄组中，胆道闭锁组GGT含量均明显高于其他胆汁淤积疾病组[Chen X等。γ-GT与年龄结合 诊断胆道闭锁的价值。儿科胃肠病学与营养学，2016,63(3):370-373]。Liu等人在“γ-GT 对早期诊断胆道闭锁的价值”中报道GGT300U/L时，其诊断胆道闭锁的精确度为60％-85％ 诊断。GGT是胆道闭锁最常用的筛查指标，但临床病例中不同患儿之间差异较大，准确性受到 局限；③其他指标：血清胆酸、凝血酶原浓度、血小板测定影响因素较多。