[发明专利]一种麦角固醇的制备方法

说明书

本发明提供了一种麦角固醇的制备方法，先将菌种超声处理，皂化，柱层析纯化，再经过两次重结晶得到麦角固醇产品。麦角固醇的提取率可达1.63%，纯度高于99%，含量高于95%。本发明结合了超声破壁和皂化提取的优势，并创新得将两个操作分步进行，大大提高提取率。除此之外，经试验发现纯化过程中，柱层析结束后进行两次重结晶，产品纯度最高，显著优于一次或三次重结晶。整个麦角固醇的制备方法，所使用的溶剂大都能够循环套用，生产条件温和，工厂易实现批量化生产，成本低，效率高，产品优质。

技术领域

本发明涉及一种麦角固醇的制备方法，属于生物医药技术领域。

背景技术

麦角固醇又称麦角甾醇，是许多微生物细胞膜的重要成分，在确保细胞活力、细胞膜的流动性以及细胞膜的完整性等方面具有重要作用，为白色针状或片状结晶，不溶于水，易溶于乙酸乙酯、苯、乙醚、石油醚等有机溶剂，化学结构如图1所示。

麦角固醇是一种重要的医药化工原料，可生产“可的松”、“黄体酮”“氢化可的松”“维生素D2”等医药，“可的松”是肾上腺皮质激素，用于治疗肾上腺皮质功能减退症、炎症和过敏性等疾病；“黄体酮”又称孕酮激素、黄体激素，用于保护女性的子宫内膜；“氢化可的松”为糖皮质激素，抗炎作用为“可的松”的1.25倍，也具有抗毒、抗休克以及免疫抑制作用；维生素D2又称麦角钙化醇，用于促进人体对钙元素和磷元素的吸收以及防止佝偻病、软骨病和手足抽搐等异常疾病的发生。

麦角固醇的提取的技术脉络大致可分为，周礼红等（专利，公开号：CN105884850A）采用有机溶剂浸提法提取麦角固醇，耗时长且麦角固醇损失较多。曹乐吟等（专利，公开号：CN109280070A）、胡晓进等（专利，公开号：CN110669092A）以及韩庆雪等（麦角固醇工业化提取工艺研究.《河北化工》，2007(02):42-43.）采用皂化方法进行提取，其中胡晓进等（专利，公开号：CN110669092A）的取得的效果为：取0.0098g麦角甾醇对照品配成25mL溶液，麦角甾醇样品2.8mg配成10mL溶液，两者经HPLC法分析，在同一流动相下，外标法测定其中含有2.1356mg麦角甾醇，且纯度低于95%。

胡代花等（正交试验优化香菇粉中麦角甾醇和VD_2超声波微波协同提取工艺.《食品工业科技》，2020,41(19):186-197）采用超声方法进行提取，但是仅超声无法将细胞膜中酯化的麦角固醇完全提取出来，提取率仅为0.36%。

杨雪莲等（专利，公开号：CN106397524A）、徐明芳等（专利，公开号：CN108828096A）、郭育涛（黑曲霉固体发酵生产麦角固醇的研究，《中国科技信息》,2008（09）：35-37.）采用超声皂化，同时进行，提取亦不够充分，且均得到的是提取样的粗品，未进行纯化操作。

韩庆雪（麦角固醇提取工艺的中试放大研究，硕士学位论文，2007）在工艺研究中优选皂化、萃取、结晶纯化三步制备麦角固醇，其中以乙酯和水为溶剂进行重结晶，其公开了结晶条件是得到高纯度麦角固醇的关健，本文在原有结晶条件的基础上改进了结晶工艺。通过控制结晶初始浓度(0.3%)、降温速度(10℃/h)、养晶过程，得到较好的麦角固醇粗品，经乙酯和水进行重结晶。采用新的结晶工艺，成品含量最高达99%，总收率为0.41%。

在针对麦角固醇的提取研究中，如何将提取率、提取纯度及含量兼顾是所要解决的根本问题。纯度指液相色谱检测中，除去溶剂峰后，药物峰占所有峰的比例；含量指以麦角固醇标准品作为外标，计算麦角固醇的产品浓度，乘以产品配置过程中的稀释浓度，再除以产品的称量量，所得百分比即得产品含量。

发明内容