[发明专利]一种富硒鼠李糖乳杆菌工业化生产方法及其所用培养基

说明书

本发明公开了一种富硒鼠李糖乳杆菌工业化生产方法及其所用培养基。所述方法包括如下步骤：1)将鼠李糖乳杆菌在种子培养基中进行活化，得到活化后的种子液；2)将所述活化后的种子液在基础发酵培养基中进行发酵培养，得到发酵液；3)将所述发酵液在富硒发酵培养基中进行发酵培养，得到发酵产物；所述富硒发酵培养基中含有破壁的富硒酵母。本发明采用高硒含量破壁的酵母作为发酵培养基中的硒源不仅有效提高了鼠李糖乳杆菌发酵过程中的硒转化率，而且还解决了现有技术用亚硒酸钠作为硒源进行发酵培养后的菌体表面残留无机亚硒酸钠的弊病。最终得到的富硒鼠李糖乳杆菌产品中的有机硒占总硒的比可达到99.5％以上。

技术领域

本发明涉及微生物发酵工程领域，具体涉及一种富硒鼠李糖乳杆菌工业化生产方法及其所用培养基。

背景技术

鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnose)是一种能够利用发酵性糖类产生乳酸的益生菌，可黏附于肠道上皮细胞并定植在人体中，具有多种生理功能。例如：抑制肠道中有害菌生长(如抑制幽门螺旋杆菌生长)，促进乳糖消化，辅助治疗便秘、腹泻，缓解溃疡性结肠炎，降低血清胆固醇，抗癌、抗过敏，提高免疫力，调节尿酸代谢改善痛风症状等生理功能。

硒是人体必需的微量元素，人体不能自己合成，必须从外界获取。世界有四十个国家土地贫硒或缺硒，中国有2/3的地区土地缺硒。科学家证实缺硒可引起人体40多种疾病(如克山病、大骨节病、癌症、心脑血管病、衰老、不孕不育等)和动物多种疾病。

富硒鼠李糖乳杆菌兼有补充硒和鼠李糖乳杆菌的双重功效，具有更好的调节胃肠道菌群和提高免疫力的作用。然而目前富硒鼠李糖乳杆菌的工业化生产方法仍未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种富硒鼠李糖乳杆菌大规模工业化生产的技术，以获得高活性、高浓度和高富有机硒鼠李糖乳杆菌。

为了实现上述目的，本发明首先提供了一种富硒鼠李糖乳杆菌的生产方法。

本发明提供的富硒鼠李糖乳杆菌的生产方法包括如下步骤：

1)将鼠李糖乳杆菌在种子培养基中进行活化，得到活化后的种子液；

2)将所述活化后的种子液在基础发酵培养基中进行发酵培养，得到发酵液；

3)将所述发酵液在富硒发酵培养基中进行发酵培养，得到发酵产物；

所述富硒发酵培养基中含有破壁的富硒酵母。

上述富硒鼠李糖乳杆菌的生产方法中，所述步骤1)包括如下步骤：

1-1)将鼠李糖乳杆菌(冻干粉)接种至种子培养基(含有种子培养基的试管)中过夜，得到过夜后的菌液；

1-2)将所述过夜后的菌液在种子培养基(含有种子培养基的试管)中继代培养，得到继代培养后的菌液；

1-3)将所述继代培养后的菌液在种子培养基(含有种子培养基的三角瓶)中进行培养，得到活化后的种子液。

进一步的，所述种子培养基包括酪蛋白胨、牛肉粉、酵母粉、葡萄糖、乙酸钠、柠檬酸二胺、吐温80、K₂HPO₄和MgSO₄·7H₂O；

所述酪蛋白胨在所述种子培养基中的浓度可为8-12g/L(或8-10g/L或10-12g/L)；具体可为8g/L或10g/L或12g/L；

所述牛肉粉在所述种子培养基中的浓度可为8-12g/L(或8-10g/L或10-12g/L)；具体可为8g/L或10g/L或12g/L；

所述酵母粉在所述种子培养基中的浓度可为4-6g/L(或4-5g/L或5-6g/L)；具体可为4g/L或5g/L或6g/L；