[发明专利]一种从救必应中分离墨旱莲皂苷I的方法有效
申请号: | 202011517257.6 | 申请日: | 2020-12-21 |
公开(公告)号: | CN114644674B | 公开(公告)日: | 2023-05-12 |
发明(设计)人: | 司红彬;钟昕;柴贝贝;廖荣;游纯波;严明;王莉贞 | 申请(专利权)人: | 广西大学 |
主分类号: | C07J63/00 | 分类号: | C07J63/00;A61P31/04 |
代理公司: | 南宁胜荣专利代理事务所(特殊普通合伙) 45126 | 代理人: | 韦慕婉 |
地址: | 530003 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 救必应 分离 墨旱莲 皂苷 方法 | ||
1.一种从救必应中分离墨旱莲皂苷I的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:将救必应浸泡于75~85%乙醇溶液中,常温提取2~4天,过滤得滤渣,再用45~55%乙醇溶液浸泡,常温提取2~4天,再次过滤得滤渣,用纯净水浸泡,常温提取2~4天,合并三次滤液,浓缩得浸膏;
S2:将浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水进行萃取,各萃取层浓缩干燥;
S3:将水萃取层的萃取物溶解于水中,然后上样于大孔吸附树脂,采用0~90%甲醇溶液进行梯度洗脱,30%为一个梯度,得到四个流份;
S4:将上述梯度洗脱中60%甲醇溶液洗脱得到的流份溶解于水中,然后上样于色谱柱Ⅰ中,进行层析分离,将所得样品点于薄层板上,收集流份Ⅰ;
S5:将流份Ⅰ进行溶解,然后上样于色谱柱Ⅱ中,进行梯度洗脱,所得样品点于薄层板上,收集流份Ⅱ;将流份Ⅱ上样于色谱柱Ⅲ,进行梯度洗脱,所得样品点于薄层板上,收集流份Ⅲ;将流份Ⅲ上样于色谱柱Ⅳ,进行梯度洗脱,所得样品点于薄层板上,收集流份Ⅳ;将流份Ⅳ用半制备高效液相色谱仪进行制备,收集流份Ⅴ,即得墨旱莲皂苷I;
所述的步骤S4中,色谱柱Ⅰ为MCI色谱柱,采用0~100%甲醇溶液为洗脱液,20%为一个梯度;
所述的流份Ⅰ为60%甲醇溶液洗脱液中比移值为0.65~0.85的流份;
所述的步骤S5中,色谱柱Ⅱ为SephadexLH-20色谱柱,采用20~100%甲醇溶液为洗脱液,10%为一个梯度;
所述的流份Ⅱ为60~80%甲醇溶液洗脱液中比移值在0.28~0.53之间的流份;
所述的步骤S5中,色谱柱Ⅲ为MCI色谱柱,采用0~100%甲醇溶液为洗脱液,10%为一个梯度;
所述的流份Ⅲ为70%甲醇溶液洗脱液中比移值为0.55的流份;
所述的步骤S5中,色谱柱Ⅳ为40F色谱柱,采用20~50%甲醇溶液为洗脱液,10%为一个梯度;
所述的流份Ⅳ为20~30%甲醇溶液洗脱液中比移值为0.55的流份;
所述的步骤S5中,半制备高效液相色谱仪的制备条件为检测波长210nm,流动相为45%的乙腈;所述的流份Ⅴ为第四个波峰的流份。
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