[发明专利]一种抗叶霉病番茄材料的制备方法及应用

权利要求书

1.一种用于提高抗叶霉病番茄材料的基因Cf-5引物：

(+):cagtCGTCTCacaacatgatgatggttactagcaa (-):cagtCGTCTCatacactagaagcgattatttcttc。

2.采用权利要求1所述用于提高抗叶霉病番茄材料的基因Cf-5引物制备抗叶霉病番茄材料的方法，其特征在于按如下的步骤进行：

1）通过番茄叶霉抗性目的基因Cf-5的保守DNA序列设计引物；

2）利用引物进行扩增，并纯化扩增产物；

3）将扩增后的产物与载体链接，得到含有目的基因的载体；

4)利用农杆菌侵染法将上述含有目的基因序列的载体转化到番茄中，以番茄子叶为外植体，通过愈伤组织诱导培养基诱导愈伤，愈伤组织转到分化培养基上诱导芽，待芽长至5厘米左右再转到生根培养基上生根；遗传转化经卡那霉素抗性筛选，愈伤组织再生，获得遗传转化植株，并进行PCR验证；

5)利用室内离体叶片抗病性鉴定，筛选抗叶霉病植株，获得抗叶霉病新材料。

3.权利要求1所述的方法，其中所述的遗传转化培养基指的是 ：

愈伤组织诱导培养基：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.7mg/L+3%蔗糖；

分化培养基:MS+6-BA2.0mg/L+IAA0.1mg/L+3%蔗糖；

生根培养基：1/2MS+IAA0.1mg/L+3%蔗糖。

4.权利要求1所述用于提高抗叶霉病番茄材料的基因Cf-5引物在用于番茄改良育种方面的应用。