[发明专利]一种埃博霉素B含量的高效液相色谱检测分析方法

说明书

本发明公开了一种埃博霉素B含量的高效液相色谱检测分析方法，其包括：S1、供试品溶液的制备：将埃博霉素B原料药与稀释剂混合；S2、对照品溶液的制备：将埃博霉素B对照品与稀释剂混合；S3、采用反相液相色谱分别对供试品溶液、对照品溶液进行检测，检测条件为：色谱柱为C18色谱柱，流动相由水、缓冲液和有机溶剂组成，按体积分数设置等度洗脱；以及采用外标法进行定量分析。

领域

本发明涉及药物分析技术领域，特别涉及一种埃博霉素B含量的高效液相色谱检测分析方法。

背景

埃博霉素B(epothilone)是一类大环内酯类化合物，从粘细菌亚目的纤维堆囊菌菌株发酵液中可以分离埃博霉素，其主要组分为EpothiloneA和B。它们具有的类似紫杉醇微管蛋白聚合和抑制微管解聚的活性使它成为了新一代抗有丝分裂药物，其作用机制与紫杉醇类药物类似，可与微管蛋白结合导致癌细胞无法顺利进行有丝分裂，进而使癌细胞产生凋亡。埃博霉素在抗肿瘤谱、抗肿瘤活性、安全性、水溶性及合成方法等方面均优于紫杉醇,有望发展成为比紫杉醇更有效的抗肿瘤药物。

除具有活性方面的优势之外，埃博霉素具有较紫杉醇简单的化学结构和良好的水溶性，而且可以发酵法生产。因此从1995年发现埃博霉素的微管解聚抑制活性以来，其相关研究已引起全球的极大的热情和关注。科学研究发现，虽然埃博霉素的作用机理与紫杉醇相似，但埃博霉素在许多方面优于紫杉醇：抗癌活性比紫杉醇高；能抑制所有的对紫杉醇过敏的或对紫杉醇抗药的肿瘤细胞；对有多种抗药性的癌症有较好的治疗效果；对一些多种药物治疗未果的癌症病人依然有治疗效果；不受细胞排毒蛋白(PhosphoglycoproteinEffluxPump)的作用，故没有紫杉醇类的抗药性问题。此外，由于化学结构比紫杉醇简单，埃博霉素B具有更好的化学修饰与优化潜力。在国外，埃博霉素B及其某些类似物已经进入三期临床试验。这个事实也验证了上述结论。不过，研究还发现，埃博霉素B仍然存在一些毒副作用。要解决埃博霉素B本身作为药物的某些缺陷，必须对埃博霉素B进行更多更广的结构优化，以期得到药性更为优异的抗癌新药。因此，以埃博霉素B为先导药物分子进行新药开发，具有极大的潜力。

为了保证埃博霉素B后续的研发和生产质量，需要对原料药及其制剂的质量进行控制。因此，研究获得一种埃博霉素B的含量测定的检测方法，这对医药生产企业来说显得尤为迫切。通过查阅中外文献及专利，目前对埃博霉素B含量的检测方法并不完善，不利于企业对产品质量的把控，所以亟需一种有效测定埃博霉素B含量的分析方法。

概述

本公开涉及一种埃博霉素B含量的高效液相色谱检测分析方法，其包括：

S1、供试品溶液的制备：将埃博霉素B原料药与稀释剂混合；

S2、对照品溶液的制备：将埃博霉素B对照品与稀释剂混合；

S3、采用反相液相色谱分别对供试品溶液、对照品溶液进行检测，检测条件为：

色谱柱为C18色谱柱，流动相由水、缓冲液和有机溶剂组成，按体积分数设置等度洗脱；以及

采用外标法进行定量分析。

附图简要说明

图1示出了本公开的空白溶液(流动相)的色谱图；

图2示出了本公开的埃博霉素B对照品溶液的色谱图；

图3示出了本公开的埃博霉素B供试品溶液的色谱图。

详述