[发明专利]牛奶光氧化标志物的筛选

说明书

本发明涉及牛奶光氧化差异性代谢物的筛选，该筛选方法包括：a)采集在避光条件下和光照条件下的乳样代谢组学数据，并在代谢组学数据中提取特征信息；b)建立分析模型，并对所述特征信息进行分析，确定光氧化导致的差异性代谢物；c)结合筛选出的差异性代谢物，研究不同光氧化程度的牛奶中差异代谢物含量变化情况。本发明方法灵敏、精确，能够用于实现对乳品光氧化程度进行评价。

技术领域

本发明涉及食品检验领域，尤其涉及牛奶光氧化标志物的筛选。

背景技术

乳品质量安全已经成为目前食品及农产品质量与安全中最重要、最受关注的问题之一。乳制品是人体所需蛋白质、脂肪、氨基酸、维生素和矿物质元素的良好来源。上世纪50年代，随着乳杀菌和包装技术的崛起，消费者能够随时随地享受美味的长保质期乳制品，然而乳制品在货架陈列过程中不可避免会曝露在光照下，而随着消费者对乳制品便捷性和美观的市场要求，大量乳制品开始使用透明塑料包装。这些塑料的包材本身无法起到很好的阻光效果，极易产生光氧化而导致品质劣化。牛奶在受到光照后，其中的蛋白质、脂质等物质很容易被氧化，使得牛奶发生变质酸败，不仅降低了营养价值，而且某些光氧化产生的化合物具有毒性，对人体产生危害。

目前工业上只针对特定乳制品的包装使用强光保护方案，如使用国外进口阻光色母生产塑料包装瓶。但含阻光色母的包装瓶不仅无法回收导致环境污染，而且造成乳品行业每年增加数十亿元的外汇成本。而对光氧化的机理和氧化水平评价报道较少。因此，了解乳制品光氧化机理，筛选能够表征光氧化指标体系，建立乳制品光氧化测试平台。进一步研究不同加工工艺及抗氧化剂对光氧化的防护作用，最终筛选出绿色环保不依赖色母阻光的光氧化抑制方案，保持乳制品的营养品质和延长保质期，同时也有利于保障乳制品安全、降低企业成本。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明实施例提供一种牛奶光氧化差异性代谢物的筛选方法和评价光氧化水平的生物标记物，该方法方便、灵敏、精确，能够用于实现对乳品光氧化程度进行评价。

本发明实施例提供一种牛奶光氧化差异性代谢物的筛选方法，包括：

a)采集在避光条件下和光照条件下的乳样代谢组学数据，并在代谢组学数据中提取特征信息；

b)建立分析模型，并对所述特征信息进行分析，确定光氧化导致的差异性代谢物；

c)结合筛选出的差异性代谢物，研究不同光氧化程度的牛奶中差异代谢物含量变化情况；步骤c)中，所述不同光氧化程度牛奶的处理条件包括不同光照强度、不同光照时长和不同氧气含量。本发明中，研究了发生不同光氧化程度牛奶中差异性代谢物含量动态变化情况，阐述了不同氧化条件对差异性代谢物的影响。

在一些优选实施例中，步骤a)中，所述乳样采用液液萃取的提取方法制备；采集代谢组学数据采用高分辨质谱或超高效液相色谱-高分辨质谱进行；

乳样的制备步骤：将所述避光条件和光照条件下的乳样进行离心，取下层液体溶于有机溶剂，再次离心，取上层溶液，经微孔过滤膜过滤后，即得；优选地

在一些优选实施例中，所述离心的转速为8×10³～1×10⁴rpm；所述离心的时间为10～30min；和/或，所述有机溶剂选自乙腈、甲醇和水中的一种或多种的混合溶剂，优选为乙腈；和/或，所述微孔过滤膜的孔径为0.2～0.5μm，优选为0.22μm。

在一些优选实施例中，步骤a)中，所述超高效液相色谱的条件包括：以流动相A和/或流动相B进行梯度洗脱；优选的，

正离子模式下，流动相A(v/v)：0.05～0.15％的甲酸-水溶液，优选0.1％的甲酸-水溶液；流动相B(v/v)：0.05～0.15％的甲酸-乙腈溶液，优选0.1％的甲酸-乙腈溶液；和/或