[发明专利]一种夹心免疫试剂盒

说明书

本发明提供了一种表面增强拉曼检测试剂盒在肌红蛋白检测中的应用，该试剂盒顶层试剂、底层试剂、BSA溶液和EDTA抗凝剂，试剂盒中顶层试剂采用3‑巯基‑1,2,4‑三氮唑分子作为拉曼检测分子，与现有技术中常用的P‑ATP分子相比较，具有更强的强化拉曼信号的功能；该表面增强拉曼检测试剂盒首次应用于人体内肌红蛋白检测，可以弥补现有检测技术中缺陷，大大提高检测限度和灵敏度，对预防脓毒症起到了关键性的作用。

技术领域

本发明涉及生化检测领域，具体涉及一种夹心免疫试剂盒。

背景技术

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是lipocalin的一种，又称人脂质运载蛋白2(lipocalin2,Ln2)或噬铁蛋白(siderocalin)，是人脂质运载蛋白家族中的一个新成员，最初是在激活中性粒细胞中被发现的一种小分子量分泌性蛋白，可参与含铁物质的运转，其体内表达水平为不同肾脏疾病的治疗、病情监测的有效指标，促进肾脏损伤后细胞增殖，抑制调亡。在肾脏损伤时NGAL可诱导肾小管上皮细胞再生。现代研究表明，NGAL是诊断急性肾损伤的最有效生物学标志之一，也是早期糖尿病肾病的有效标志物之一。

β2-微球蛋白是由淋巴细胞、血小板、多形核白细胞产生的一种小分子球蛋白，分子质量为11800，由99个氨基酸组成的单链多肽。它是细胞表面人白细胞抗原(HLA)的β链(轻链)部分，分子内含一对二硫键，不含糖；与免疫球蛋白稳定区的结构相似。广泛存在于血浆、尿液、脑脊液、唾液以及初乳中。正常人β2-微球蛋白的合成率及从细胞膜上的释放量相当恒定，β2-微球蛋白可以从肾小球自由滤过，99.9％在近端肾小管吸收，并在肾小管上皮细胞中分解破坏；故而正常情况下β2-微球蛋白的排出是很微量的。

在临床上血清β2-微球蛋白的升高可反映肾小球滤过功能受损或滤过负荷是否增加的情况；而尿液中排出β2-微球蛋白增高，则提示肾小管损害或滤过负荷增加；在急慢性肾盂肾炎时，因肾脏受损，故尿β2-微球蛋白升高，而膀胱炎患者则β2-微球蛋白正常；肾移植患者血、尿β2-微球蛋白明显增高，提示机体发生排斥反应，因β2-微球蛋白合成加速，虽肾清除增多，而血β2-微球蛋白仍增高。一般在移植后2～3天血β2-微球蛋白上升至高峰，随后逐渐下降。肾移植后连续测定血、尿β2-微球蛋白可作为肾小球和肾小管病变的敏感指标。如肾移植虽有少尿，但血β2-微球蛋白下降者提示预后良好。排异时血β2—微球蛋白增高先于Cr，测定β2-微球蛋白，有助于诊断尚处于亚临床期肾发生的排斥反应。尿β2-微球蛋白测定也有助于鉴别上、下尿路感染，上尿路感染易影响肾小管对分子蛋白质的再吸收，尿β2微球蛋白升高，而下尿路感染尿β2微球蛋白不会升高。

急性心肌梗塞(AMI)为冠状动脉急性闭塞，血流中断，所引起的局部心肌的缺血性坏死。其典型病症表现为心前区疼痛或憋闷感，疼痛或憋闷部位主要指胸骨后方，向下方延伸到左侧肋骨、上腹部，向上可到左侧肩、背甚至口腔、头部，部分也可表现在左上肢。疼痛性质多为心前区的“压迫感、挤压感、沉重感”，部分患者胸部无明显感觉，仅胸部以外其他部位有钝痛或不适感。疼痛持续时间较长，多超过30min以上，无明显疼痛峰值，安静休息或应用硝酸甘油等药物并不能很快地减轻症状。

自2002年起，急性心肌梗塞的发生率总体上呈上升趋势，和以前相比较，农村地区发生率明显增强，部分年份的农村地区发病率甚至超过城市，2016年，城市急性心肌梗塞的死亡率是58.69/10万，农村为74.72/10万。此外，45岁以下人群急性心肌梗塞的发病率呈逐年上升趋势，而45岁以上人群发病率呈逐年下降趋势。

急性心肌梗塞患者主要表现症状为突然发作，持续时间超过30min的心前区压榨性疼痛或憋闷感，患者常有濒死的感觉。因此，急性心肌梗塞的早期诊断、早期阴性排除具有十分重要的作用，同时急性心肌梗塞的预后也是十分重要的环节，这对于经治疗以后患者的恢复、并发症、复发和死亡概率的判断十分重要。