[发明专利]检测C5补体的试剂盒及其检测方法和用途

说明书

本发明属于免疫检测领域，涉及一种检测C5补体的试剂盒及其检测方法和用途。具体来说，本发明涉及检测C5补体的试剂盒，及其在制备用于检测病原体感染的诊断剂、用于肿瘤标志物的早期诊断筛查的诊断剂，或制备检测C5补体的试剂或试剂盒中的用途。本发明提供的试剂盒的检测结果准确度高、精密度高、稳定性好、线性好，可用于癌症的初步筛查以及术后跟踪，为肿瘤进展的风险程度提供可靠信息；也可用于检测病毒、细菌、真菌、支原体、衣原体、立克次氏体中的一种或多种病原体，对临床具有指导意义。

技术领域

本发明属于免疫检测领域，具体涉及一种检测C5补体的试剂盒及其检测方法和用途。

背景技术

补体成分5(The fifth component of complement,C5)是补体系统中一种重要组分，目前有关C5基因在人类、小鼠、虹鳟鱼、牛这几种生物中都有报道。人类C5基因位于9号染色体长臂32-34区。C5前体蛋白由α、β两条多态链通过二硫键组成，分子量为190kDa。靠近N端的第74-75位精氨酸-亮氨酸键为C5转化酶作用的部位。无活性C5前体蛋白在C5转化酶的作用下，C5酶链N末端裂解出一个小片段C5a进入液相中，其余部分为C5b，仍结合在细胞膜表面。

感染是由细菌、病毒入侵机体而造成，不能高效的鉴别病原体，导致抗生素的滥用现象越来越严重，细菌感染引发耐药性，抗生素的耐药性不断发生。临床上作细菌培养需要3-5天时间，等待的时间过长，耽误救治，医生无法当即给出患者的用药方案，等细菌培养好再用药，耽误病机。

C5测定世界各国包括中国都是沿用免疫扩散法和ELISA双抗体夹心技术，此方法费时费力，准确率不高，病人取报告需要2天。市面上某人补体C5检测试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被补体成分5(C5)透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中补体成分5(C5)浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中补体成分5(C5)含量。

由于现有技术中存在的缺陷，目前亟待提供一种快速、准确检测C5补体浓度的试剂盒。

发明内容

发明要解决的问题

由于现有技术中存在以上问题，本发明的目的在于提供一种快速、结果准确度高、精密度高、稳定性好、线性好的检测细菌和/或病毒感染的试剂盒。

用于解决问题的方案

(1)一种检测C5补体的试剂盒，其中，所述试剂盒包括：

试剂I：第一缓冲液、第一PEG缓冲液；

试剂II：抗C5补体抗体，包含有单克隆抗体和/或多克隆抗体、第二PEG缓冲液、IgG；所述第一缓冲液的pH值为3～10。

(2)根据(1)所述的试剂盒，其中，所述抗C5补体抗体选自兔抗人C5补体抗体、羊抗人C5补体抗体、鼠抗人C5补体抗体中的一种或两种以上的组合；优选的，所述兔抗人C5补体抗体、所述羊抗人C5补体抗体、所述鼠抗人C5补体抗体为单克隆抗体或多克隆抗体；任选的，所述抗C5补体抗体的抗体效价为1:64-1:128，浓度为100ml/L～800ml/L。

(3)根据(1)或(2)所述的试剂盒，其中，多克隆抗体用微量二氧化锰或高锰酸钾处理修饰后，抗C5补体抗体亲脂性基团改为亲水性。

(4)根据(1)或(2)所述的试剂盒，其中，C5补体单克隆抗体用微量二氧化锰或高锰酸钾处理修饰后，抗C5补体抗体亲脂性基团改为亲水性。