[发明专利]加速的DNA四面体分子探针在miRNA检测及活细胞成像中的应用

权利要求书

1.加速的DNA四面体分子探针，其特征在于，所述加速的DNA四面体分子探针accelerated-DTMB包含：一个DNA发卡结构HP和一个荧光染料修饰的分子探针MB嵌入的DNA四面体，即DNA四面体分子探针DTMB；所述DNA四面体分子探针DTMB由四条DNA单链S1、S2、S3和S4自组装而成；所述DNA发卡结构HP序列如SEQ ID NO.5所示；所述S1、S2、S3和S4序列如SEQ ID NO.1-4所示；荧光染料FAM和Dabcyl分别修饰在分子探针MB的颈部两侧对应位置，所述分子探针MB位于DTMB的一条棱S1的延伸部分，DNA发卡结构HP通过碱基互补连接在靠近MB的顶点；

所述的加速的DNA四面体分子探针的制备方法的制备步骤如下：

（1）将DNA发卡结构HP预先溶于1×TAE/Mg²⁺缓冲液，其HP终浓度为2μM，95℃加热5分钟后，迅速放入冰浴中，维持半小时，使其形成稳定的发卡结构HP；

（2）将探针S1、S2、S3和S4等比例溶于1×TAE/Mg²⁺缓冲液中，使得各探针浓度为2μM，95℃加热8分钟，迅速放入冰浴中，维持半小时，使其完全杂交形成DNA四面体分子探针DTMB；

（3）等体积比例混合HP和DTMB于1×TAE/Mg²⁺缓冲液中，在37℃下反应3小时，组装形成加速的DNA四面体分子探针。

2.一种如权利要求1所述的加速的DNA四面体分子探针在miRNA检测及活细胞成像中的应用。