[发明专利]抗菌多肽复合物及其制备方法和应用在审
申请号: | 202011528283.9 | 申请日: | 2020-12-22 |
公开(公告)号: | CN113144210A | 公开(公告)日: | 2021-07-23 |
发明(设计)人: | 王俊捷;傅敏 | 申请(专利权)人: | 梅奥(浙江)细胞工程有限责任公司 |
主分类号: | A61K47/52 | 分类号: | A61K47/52;A61K9/51;A61K47/42;A61K38/17;A61P31/20 |
代理公司: | 天津市尚仪知识产权代理事务所(普通合伙) 12217 | 代理人: | 王山 |
地址: | 324302 浙江省衢州市开*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抗菌 多肽 复合物 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种抗菌多肽复合物,为MSN@T7E21R-HD5@SC,其中包括抗菌衍生肽T7E21R-HD5,T7E21R-HD5的氨基酸序列为ATCYCRRGRCATRESLSGVCRISGRLYRLCCR (Cys3-Cys31/Cys5-Cys20/Cys10-Cys30),含有三对二硫键,带7个正电荷,其分子量为 3664.0 Da;6个半胱氨酸两两配对形成三对定向搭配的分子间二硫键;介孔二氧化硅纳米粒子MSN通过静电吸附作用负载T7E21R-HD5抗菌肽,琥珀酰酪蛋白SCN包裹在介孔二氧化硅纳米粒子MSNs之外。
2.一种权利要求1所述抗菌多肽复合物的制备方法,包括以下步骤:
a.称取0.068g三乙醇胺TEA溶于25mL去离子水中,80℃搅拌30min;
b.加入0.38g溴化十六烷基三甲胺CTAB继续搅拌1h;
c.向上述溶液中加入4mL正硅酸乙酯TEOS搅拌2h;
d.12000rpm离心15min收集反应产物,去离子水和乙醇各洗三次;
e.样品加入到含1%硝酸铵的乙醇80℃回流40min,以去除CTAB;
f.12000rpm离心15min收集反应产物,去离子水和乙醇各洗三次,真空干燥4℃
保存备用;
g.取100μL浓度为1mg/mL的T7E21R-HD5溶液加到含20μgMSN的溶液中,4℃震荡孵育过夜;
h.分别将琥珀酰胺和酪氨酸充分溶解,然后将琥珀酰胺溶液滴加到酪氨酸溶液中,搅拌1h后,以氢氧化钠溶液调整混合溶液的pH至9,继续搅拌1h,得琥珀酰酪氨酸;
i.将制备好的琥珀酰化的酪氨酸滴加到MSN@T7E21R-HD5溶液中,4℃反应过夜;
j.10000rpm离心,10min,
用灭菌水清洗三次,得制备好的MSN@T7E21R-HD5@SCN。
3.根据权利要求2所述的所述抗菌多肽复合物的制备方法,其特征在于:MSN与T7E21R-HD5 质量比为 2:1。
4.一种权利要求1所述抗菌多肽复合物在预防或治疗人乳头瘤病毒HPV中的应用。
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