[发明专利]度洛西汀的检测方法

说明书

本发明提供了度洛西汀的检测方法，包括：制备具有度洛西汀和未含有度洛西汀的空白样本的至少三种浓度的标准溶液，标准溶液中的空白样本的量相同；利用液相色谱仪在检测条件下检测每一种标准溶液，获得标准溶液对应的第一检测结果；根据各个第一检测结果和标准溶液中度洛西汀的浓度，拟合度洛西汀的标准曲线方程；取待处理样品离心后的第一上清液；向第一上清液内加入萃取剂，涡旋混匀，对第一上清液进行萃取，得到待测样品；利用液相色谱仪在检测条件下检测待测样品，获得待测样品的第二检测结果；基于标准曲线方程和第二检测结果，得到待测样品中度洛西汀的浓度。本方案能够缩短样品检测时间。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，特别涉及度洛西汀的检测方法。

背景技术

度洛西汀为白色或类白色结晶性粉末，在水中略溶，在甲醇中易溶，是一种选择性5-羟色胺再摄取抑制剂。

目前，检测样品中度洛西汀含量通常采用的方法为高效液相色谱法。而现有检测方法通常采用单一色谱柱进行检测，增加了等待色谱柱清洗的时间，从而导致样品检测时间较长。

发明内容

本发明提供了度洛西汀的检测方法，能够缩短样品检测时间。

为了解决上述问题，本发明实施例提供了度洛西汀的检测方法，包括：

制备至少三种浓度的标准溶液，其中，所述标准溶液为具有度洛西汀和未含有度洛西汀的空白样本的溶液，所述至少三种浓度的标准溶液中的空白样本的量相同；

利用液相色谱仪在预设的检测条件下分别检测每一种所述标准溶液，获得每一种所述标准溶液对应的第一检测结果；

根据各个所述第一检测结果和所述标准溶液中度洛西汀的浓度，拟合度洛西汀的标准曲线方程；

对待处理样品进行离心处理，取离心后的第一上清液；

向所述第一上清液内加入萃取剂，涡旋混匀，对所述第一上清液进行萃取，得到待测样品；

利用液相色谱仪在所述检测条件下检测所述待测样品，获得所述待测样品的第二检测结果；

基于所述标准曲线方程和所述第二检测结果，得到所述待测样品中度洛西汀的浓度。

需要说明的是，空白样本包括未含有度洛西汀的血清或血浆；第一上清液包括血清或血浆；萃取后选择为上层有机相。

具体地，可以通过下述步骤制备标准溶液：

(1)标准储备液的配制

精确称取度洛西汀标准品置于容量瓶中，用甲醇进行溶解，并定容至容量瓶标线，得到标准储备液，并在-80℃条件下保存。

(2)标准工作液的配制

取适量步骤(1)中标准储备液，用含有40％-60％甲醇的水溶液作为稀释液进行稀释混合，得到含有320-11520ng/mL度洛西汀的标准工作液，并在-80℃条件下保存。

(3)标准溶液的标定

分别移取步骤(2)中不同浓度的标准工作液置于离心管中，分别向各个离心管中加入空白样本，混合制成至少三种不同浓度的混合溶液，将上述混合溶液在转速为1500-2500rpm下涡旋混匀2-5min后，加入萃取剂进行萃取，得到标准溶液。

为了保证度洛西汀充分溶解，选择甲醇进行溶解；同时为了降低标准工作液反复使用过程中的挥发，确保标准工作液的稳定性，所以度洛西汀的稀释液为含有40％-60％甲醇的水溶液。

优选地，所述检测条件中的液相条件，包括：

洗脱流动相中的水相包括：含有20-80mM乙酸铵和0.05％-0.3％甲酸的水溶液；