[发明专利]一种热提取结合分散固相萃取测定鲜烟叶中硝酸根与亚硝酸根的方法

权利要求书

1.一种热提取结合分散固相萃取测定鲜烟叶中硝酸根与亚硝酸根的方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1鲜烟叶样品的预处理：先将采集的鲜烟叶样品进行液氮速冻处理，然后采用低温冷冻干燥法干燥，干燥后将其研磨成粉末，得鲜烟叶样品粉末备用；

S2鲜烟叶样品中硝酸根与亚硝酸根的提取与净化：称取一定量的鲜烟叶样品，同时加入稀碱性溶液与分散固相萃取基质，采用热提取结合分散固相萃取的方法同时进行提取与净化样品中的硝酸根与亚硝酸根；

S3硝酸根与亚硝酸的测定方法：将提取液采用离子相互作用反相液相色谱-二极管阵列检测器进行分离与定量，以保留时间定性，外标法定量。

2.根据权利要求1所示的一种热提取结合分散固相萃取测定鲜烟叶中硝酸根与亚硝酸根的方法，其特征在于：鲜烟叶样品中硝酸根与亚硝酸根的提取与净化方法为：称取50-100mg鲜烟叶粉末于10mL玻璃离心管中，准确加入50-100mg分散固相萃取基质后再加入4-8mL稀碱性溶液，放入60℃水浴中加热提取10-20min，再放入涡旋振荡器中涡旋，分散固相萃取净化10-20min后3000rpm离心5min，将上层清液过0.22μm水系滤膜后进行色谱分析。

3.根据权利要求2所示的一种热提取结合分散固相萃取测定鲜烟叶中硝酸根与亚硝酸根的方法，其特征在于：所述的稀碱性溶液为0.05M氢氧化钠溶液。

4.根据权利要求2所示的一种热提取结合分散固相萃取测定鲜烟叶中硝酸根与亚硝酸根的方法，其特征在于：所述的分散固相萃取基质为～100目活性炭粉末。

5.根据权利要求1所示的一种热提取结合分散固相萃取测定鲜烟叶中硝酸根与亚硝酸根的方法，其特征在于：硝酸根与亚硝酸的测定方法为：超高效液相色谱-二极管阵列检测器，色谱柱为UPLC HSS T3色谱柱，(2.1mm×100mm,1.8μm,)，液相色谱流速为0.15mL/min，色谱柱温度为35℃，检测波长210nm，进样量为1μL，运行时间8min。流动相组成30％甲醇水溶液，加入特定量与比例的离子相互作用试剂，pH为6.0-6.5。二极管阵列检测器测定为全波长扫描200-400nm，分辨率1.2nm。在此色谱条件下，亚硝酸与硝酸根的保留时间分别为3.68与4.12min。

6.根据权利要求5所示的一种热提取结合分散固相萃取测定鲜烟叶中硝酸根与亚硝酸根的方法，其特征在于：所述的特定量与比例的离子相互作用试剂为辛胺+正磷酸(85％)：30％甲醇水溶液(v/v)＝0.259％，辛胺：正磷酸(85％)(v/v)＝763:273。