[发明专利]耐盐芽孢杆菌及其用途

权利要求书

1.一株耐盐芽孢杆菌（Bacillus Halotolerans），其特征在于，所述耐盐芽孢杆菌已于2020年11月4日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No: 61271，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼。

2.一种耐盐蛋白酶提取液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

以权利要求1所述的耐盐芽孢杆菌为发酵菌株进行发酵，从所得发酵产物中提取所述耐盐蛋白酶提取液；

发酵所采用的条件为：发酵温度为36.5℃～37.5℃，发酵转速为180rpm～200rpm，发酵时长为72h～120h；发酵所采用的培养基包含0.5wt%～1.5 wt%黄豆粉、0.3wt%～0.8wt%麸皮、0.5wt%～1.5wt%玉米粉以及97wt%～98.7wt%水；

从所得发酵产物中提取所述耐盐蛋白酶提取液的步骤为：

1）对所述发酵产物进行离心，收集上层清液；

2）向所述上层清液中加入硫酸铵，静置，收集下层浊液，

3）对所述下层浊液进行离心，收集沉淀；

步骤1）中，离心所采用的条件为：转速为11000rpm～13000rpm，温度为2℃～5℃，时长为8 min～12min；

步骤2）中，静置所采用的条件为：温度为2℃～5℃，时长为50min～70min；

步骤3）中，离心所采用的条件为：转速为9000rpm～10000rpm，温度为2℃～5℃，时长为8min～12min；

所述制备方法还包括去除所述沉淀中的杂质、纯化耐盐蛋白酶提取液的步骤，纯化的方式包括透析，透析采用分子截留量为14000Da的透析袋。

3.通过权利要求2所述的方法制备的耐盐蛋白酶提取液；

所述耐盐蛋白酶提取液在盐浓度为15wt %时保持酶活力50%以上；

所述耐盐蛋白酶提取液在pH 4.0～10.0范围内保持78%以上酶活力；

所述耐盐蛋白酶提取液在40℃～80℃范围内保持78%以上酶活力。

4.权利要求3所述的耐盐蛋白酶提取液在酱油制备中的用途。

5.一种酱油的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

用权利要求3所述的耐盐蛋白酶提取液对酱油中的沉淀物进行酶解。

6.根据权利要求5所述的酱油的制备方法，其特征在于，酶解所使用的温度为40℃～80℃。

7.根据权利要求5所述的酱油的制备方法，其特征在于，所述酱油为酱油原油。