[发明专利]用于马立克病病毒LAT基因簇miRNA基因编辑的gRNA引物及其应用有效
| 申请号： | 202011535932.8 | 申请日： | 2020-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN112574995B | 公开（公告）日： | 2021-11-30 |
| 发明（设计）人： | 滕蔓;罗俊;张改平;楚钰淑;郑鹿平;刘金玲;柴书军;赵东 | 申请（专利权）人： | 河南省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N15/66;C12N15/55;C12N7/00;C12R1/93 |
| 代理公司： | 郑州市华翔专利代理事务所(普通合伙) 41122 | 代理人： | 张爱军 |
| 地址： | 450002 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 马立克病 病毒 lat 基因 mirna 编辑 grna 引物 及其 应用 | ||
1.用于马立克病病毒LAT基因簇miRNA基因编辑的gRNA引物，其特征在于，所述gRNA引物位于马立克病病毒LAT基因簇miRNA即LAT-miRNA的5’ 端和3’端两侧的保守区域，分别为：LAT-gRF1、LAT-gRF2、LAT-gRF3、LAT-gRF4以及LAT-gRR1、LAT-gRR2、LAT-gRR3、LAT-gRR4，其序列分别为序列表中SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列。
2.权利要求1所述的gRNA引物用于马立克病病毒LAT-miRNA基因编辑的方法，其特征在于，所述方法中合成gRNA引物的上下游单链oligo分别为：LAT-gRF1-5p、LAT-gRF1-3p、LAT-gRF2-5p、LAT-gRF2-3p、LAT-gRF3-5p、LAT-gRF3-3p、LAT-gRF4-5p、LAT-gRF4-3p以及LAT-gRR1-5p、LAT-gRR1-3p、LAT-gRR2-5p、LAT-gRR2-3p、LAT-gRR3-5p、LAT-gRR3-3p、LAT-gRR4-5p、LAT-gRR4-3p，其序列分别为序列表中SEQ ID NO.17~SEQ ID NO.32所示的核苷酸序列。
3.一种如权利要求1所述的gRNA引物在与GX0101毒株具有高度保守LAT-miRNA基因序列的血清1型马立克病病毒MDV-1毒株的编辑及基因组改造中的应用。
4.一种如权利要求1所述的gRNA引物在LAT-miRNA基因位点的基因编辑敲除、外援基因编辑插入或重组疫苗研发中的应用。
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