[发明专利]一种淋巴细胞的扩增体系及扩增方法有效
| 申请号： | 202011538923.4 | 申请日： | 2020-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN112553157B | 公开（公告）日： | 2023-07-07 |
| 发明（设计）人： | 彭昉;俞英豪;王冶陶 | 申请（专利权）人： | 杭州中赢生物医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;C12N5/09;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 王欢 |
| 地址： | 310052 浙江省杭州市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 淋巴细胞 扩增 体系 方法 | ||
1.一种淋巴细胞的扩增体系，其特征在于，包括组分1和组分2；
所述组分1包括灭活的基因工程细胞1、胎牛血清、IL-2和RPMI1640培养基；
所述组分2包括灭活的基因工程细胞2和RPMI1640培养基；
所述基因工程细胞1为表达CD80、IL21、IL12的滋养细胞；
所述基因工程细胞2为表达CD80、IL12的滋养细胞；
所述IL-21为跨膜IL-21；所述CD80为跨膜CD80；所述IL-12由IL-12A和IL-12B组成。
2.根据权利要求1所述的扩增体系，其特征在于，所述组分1中，IL-2的浓度为20～400U/mL，胎牛血清的质量百分比含量为5～15％。
3.根据权利要求1所述的扩增体系，其特征在于，基因工程细胞1和基因工程细胞2的滋养细胞为K562细胞。
4.权利要求1～3任一项所述的扩增体系在扩增淋巴细胞中的应用。
5.一种淋巴细胞的扩增方法，其特征在于，包括：
将PBMC或NK细胞接种至权利要求1～3任一项所述扩增体系的组分1中，培养；
向上述体系中加入权利要求1～3任一项所述扩增体系的组分2，再培养。
6.根据权利要求5所述的扩增方法，其特征在于，所述PBMC或NK细胞的接种密度为1×106cell/mL。
7.根据权利要求5所述的扩增方法，其特征在于，所述基因工程细胞1与所述PBMC的细胞数量比为1:1。
8.根据权利要求5所述的扩增方法，其特征在于，所述培养为37℃，5％CO2条件下培养5～10天；所述再培养为37℃，5％CO2条件下培养5～10天。
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