[发明专利]一种淋巴细胞的扩增体系及扩增方法有效
申请号: | 202011538923.4 | 申请日: | 2020-12-23 |
公开(公告)号: | CN112553157B | 公开(公告)日: | 2023-07-07 |
发明(设计)人: | 彭昉;俞英豪;王冶陶 | 申请(专利权)人: | 杭州中赢生物医疗科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;C12N5/09;C12N5/10 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 王欢 |
地址: | 310052 浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 淋巴细胞 扩增 体系 方法 | ||
1.一种淋巴细胞的扩增体系,其特征在于,包括组分1和组分2;
所述组分1包括灭活的基因工程细胞1、胎牛血清、IL-2和RPMI1640培养基;
所述组分2包括灭活的基因工程细胞2和RPMI1640培养基;
所述基因工程细胞1为表达CD80、IL21、IL12的滋养细胞;
所述基因工程细胞2为表达CD80、IL12的滋养细胞;
所述IL-21为跨膜IL-21;所述CD80为跨膜CD80;所述IL-12由IL-12A和IL-12B组成。
2.根据权利要求1所述的扩增体系,其特征在于,所述组分1中,IL-2的浓度为20~400U/mL,胎牛血清的质量百分比含量为5~15%。
3.根据权利要求1所述的扩增体系,其特征在于,基因工程细胞1和基因工程细胞2的滋养细胞为K562细胞。
4.权利要求1~3任一项所述的扩增体系在扩增淋巴细胞中的应用。
5.一种淋巴细胞的扩增方法,其特征在于,包括:
将PBMC或NK细胞接种至权利要求1~3任一项所述扩增体系的组分1中,培养;
向上述体系中加入权利要求1~3任一项所述扩增体系的组分2,再培养。
6.根据权利要求5所述的扩增方法,其特征在于,所述PBMC或NK细胞的接种密度为1×106cell/mL。
7.根据权利要求5所述的扩增方法,其特征在于,所述基因工程细胞1与所述PBMC的细胞数量比为1:1。
8.根据权利要求5所述的扩增方法,其特征在于,所述培养为37℃,5%CO2条件下培养5~10天;所述再培养为37℃,5%CO2条件下培养5~10天。
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