[发明专利]一种马铃薯蛋白水解物，制备及在贴壁细胞培养中的应用

权利要求书

1.一种马铃薯蛋白水解物，其特征在于，其包含复合活性多肽和氨基酸；所述氨基酸的含量至少为25wt%；

所述马铃薯蛋白水解物的制备方法，其包括如下步骤：

（1）底物配制：取马铃薯蛋白粉置于反应釜中，加入纯水搅拌溶解得到马铃薯蛋白粉溶液；

（2）酶解：在上述马铃薯蛋白粉中加入风味蛋白酶，搅拌混匀之后加入0.1M/L HCl调节pH至5.5~7.5，设置温度至40~60摄氏度，酶解反应3~8小时；

（3）灭活：对上述酶解后的体系升温至至少95摄氏度以上，处理至少15min，然后冷却至室温收集粗制水解液；

（4）后处理：对所述粗制水解液进行离心收集上层清液，并通过5kD截留分子量超滤膜超滤，收集小于5kD分子量的水解液，得到精制水解液，干燥，即得；

所述蛋白酶与马铃薯蛋白粉的比例为（5000~35000）U：1g；

所述酶解反应中搅拌速度为300~900rpm/min。

2.根据权利要求1所述的马铃薯蛋白水解物，其特征在于，所述复合活性多肽至少包含如下氨基酸序列的多肽：

SEQ ID No 1：GQLIVVPQNF

SEQ ID No 2：QLIVVPQNF

SEQ ID No 3：IDPGDSDIIK

SEQ ID No 4：GGGGGYGGGGGYGGGGGGGYGGGR

SEQ ID No 5：VPTVDVSVVDL

SEQ ID No 6：NPEEIPWG

SEQ ID No 7：APGKPPVDY

SEQ ID No 8：APIDVVVPPGNTGLDPS。

3.根据权利要求2所述的马铃薯蛋白水解物，其特征在于，所述复合活性多肽还包含如下氨基酸序列的多肽：

SEQ ID No 9：PPVLPPQE

SEQ ID No 10：VPELGPDVNF

SEQ ID No 11：GEGTNTWDRFE。

4.根据权利要求1所述的马铃薯蛋白水解物，其特征在于，所述氨基酸至少包含氨基酸组合；所述氨基酸组合由丝氨酸、谷氨酸、缬氨酸、亮氨酸、酪氨酸、氨基丁酸、组氨酸、脯氨酸、谷氨酰胺组成；所述氨基酸组合的含量至少占所述马铃薯蛋白水解物质量的18wt%。

5.根据权利要求1所述的马铃薯蛋白水解物的制备方法，其特征在于，所述马铃薯蛋白粉溶液的浓度为5~12wt%。

6.一种根据权利要求1~4任一项所述的马铃薯蛋白水解物的应用，其特征在于，应用于MDCK贴壁细胞培养领域。

7.一种细胞培养基，其特征在于，其包含根据权利要求1~4任一项所述的马铃薯蛋白水解物；所述马铃薯蛋白水解物的含量为0.3~0.7g/L。