[发明专利]一种副溶血性弧菌检测方法有效
申请号: | 202011542903.4 | 申请日: | 2020-12-23 |
公开(公告)号: | CN112760356B | 公开(公告)日: | 2022-06-24 |
发明(设计)人: | 蒋晨豪;李昱权;孙雨玘;叶海芬;陈佳琪;宁景苑;张建锋;易晓梅;惠国华 | 申请(专利权)人: | 浙江农林大学 |
主分类号: | C12Q1/06 | 分类号: | C12Q1/06;G01N27/327;G01N27/48 |
代理公司: | 杭州天麟知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 33374 | 代理人: | 占宇 |
地址: | 311300 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 溶血 弧菌 检测 方法 | ||
本发明公开了一种副溶血性弧菌检测方法。它包括以下步骤:S1:配置不同浓度的副溶血性弧菌悬浮液,检测每个浓度的副溶血性弧菌悬浮液对应的特征值Y,将这些值进行拟合得到浓度计算公式:Y=0.2+0.1×LgX,X为副溶血性弧菌的浓度;S2:取待测副溶血性弧菌悬浮液,检测其对应的特征值Y,根据浓度计算公式:Y=0.2+0.1×LgX,计算出待测副溶血性弧菌悬浮液的浓度。本发明能够准确检测出副溶血性弧菌浓度,操作简单。
技术领域
本发明涉及细菌检测技术领域,尤其涉及一种副溶血性弧菌检测方法。
背景技术
食源性疾病指的是食品被致病菌污染后,通过摄食的方式进入到人体里,并致使人体感染或中毒,威胁人们身体健康健康和生命安全的一类疾病的统称。虽然现代科学技术的发展已到了一定的水平,但是不管在发达还是发展中国家,食源性疾病仍然严重地危害着人们的身体健康,近年来频频发生的食品安全事件也表明了食源性疾病尚未得到有效的控制,因此开发新型的准确检测食源性致病菌的检测技术至关重要,它对预防、控制食源性疾病,保障人们的健康有着重要的意义。
副溶血性弧菌能引起新生儿脑膜炎、败血症和坏死性小肠结膜炎等疾病,对人们身体健康和生命安全构成严重的威胁,因此研究准确检测副溶血性弧菌的方法具有重要意义。现有的副溶血性弧菌检测方法一般采用化学检测法,存在操作繁琐,重复性差的不足。
发明内容
本发明为了解决上述技术问题,提供了一种副溶血性弧菌检测方法,其能够准确检测出副溶血性弧菌浓度,操作简单。
为了解决上述问题,本发明采用以下技术方案予以实现:
本发明的一种副溶血性弧菌检测方法,包括以下步骤:
S1:配置不同浓度的副溶血性弧菌悬浮液,检测每个浓度的副溶血性弧菌悬浮液对应的特征值Y,将这些值进行拟合得到浓度计算公式:Y=0.2+0.1×LgX,X为副溶血性弧菌的浓度;
S2:取待测副溶血性弧菌悬浮液,检测其对应的特征值Y,根据浓度计算公式:Y=0.2+0.1×LgX,计算出待测副溶血性弧菌悬浮液的浓度。
作为优选,所述检测某个浓度的副溶血性弧菌悬浮液对应的特征值Y的方法包括以下步骤:
M1:将第一工作电极、第一对电极、第一参比电极组成第一电化学传感器阵列,将第二工作电极、第二对电极、第二参比电极组成第二电化学传感器阵列,第一工作电极上未培育副溶血性弧菌抗原,第二工作电极上培育有副溶血性弧菌抗原;
M2:采用同样方法对该浓度的副溶血性弧菌悬浮液进行m次检测,每次检测的检测步骤如下:
在未使用过的第一工作电极、未使用过的第二工作电极上都滴加2.5μl该浓度的副溶血性弧菌悬浮液,静置30分钟后,将第一电化学传感器阵列、第二电化学传感器阵列分别插入两个同样的缓冲溶液内并采用循环伏安法从小到大依次切换n种不同的扫描速率进行检测,得到n个还原峰电流差值ΔIpi1、ΔIpi2…ΔIpin,ΔIpin=Ip1in-Ip2in,ΔIpin为第i次检测中第n种扫描速率下的还原峰电流差值,Ip1in为第i次检测中第n种扫描速率下第一电化学传感器阵列对应的还原峰电流值,Ip2in为第i次检测中第n种扫描速率下第二电化学传感器阵列对应的还原峰电流值,1≤i≤m;
M3:根据m次检测的检测数据构建出特征矩阵D,
M4:将特征矩阵D的每行数据进行二次样条插值,得到m个与每行数据对应的曲线x(t),对m个曲线x(t)进行同样的数据处理,得到m个特征值F,对每个曲线x(t)进行的数据处理包括以下步骤:
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