[发明专利]一种基于过氧草酸酯类化学发光体系的生物标志物联合检测方法及试剂盒在审
申请号: | 202011549788.3 | 申请日: | 2020-12-24 |
公开(公告)号: | CN112782136A | 公开(公告)日: | 2021-05-11 |
发明(设计)人: | 严竹林 | 申请(专利权)人: | 湖南博奥瑞康生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N33/533 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 薛红凡 |
地址: | 410013 湖南省长沙市高新开发区*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 过氧 草酸 化学 发光 体系 生物 标志 联合 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种基于过氧草酸酯类化学发光体系的生物标志物联合检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将样品与组份1、组份2混合,充分反应;其中,所述组份1为含有标记不同荧光基团的特异性抗体溶液,所述组份2为包被特异性抗体的磁珠悬浊液;
(2)利用磁场固定反复漂洗,去除未发生反应的组份1;
(3)加入组份3和组份4,充分反应,检测并记录反应溶液在不同波长下的发光强度数值,计算得到样品中生物标志物的浓度值;其中,所述组份3为含有双草酸酯的溶液,所述组份4为含有过氧化氢的溶液。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述样品为含有一种或多种生物标志物的样品,所述生物标志物包括蛋白质、核酸、小分子。
3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述抗体为cTnI、NT-proBNP和D-dimer中的任意两种或三种所对应的特异性抗体。
4.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述抗体标记的不同荧光基团为FAM、Cy3和Cy5中的任意两种或三种。
5.根据权利要求4所述的检测方法,其特征在于,所述荧光基团FAM、Cy3、Cy5的发射波长分别为520nm、563nm、662nm。
6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(1)所述反应条件为35℃~39℃孵育3~8min。
7.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤(3)所述反应条件为35℃~39℃孵育1~3min。
8.一种生物标志物联合检测的试剂盒,其特征在于,包括组份1、组份2、组份3、组份4;其中组份1为含有标记不同荧光基团的特异性抗体溶液,组份2为包被特异性抗体的磁珠悬浊液,组份3为含有双草酸酯的溶液,组份4为含有过氧化氢的溶液。
9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述抗体为cTnI、NT-proBNP和D-dimer中的任意两种或三种所对应的特异性抗体,所述抗体标记的不同荧光基团为FAM、Cy3和Cy5中的任意两种或三种。
10.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述双草酸酯的溶液为1.0~5.0mM的双草酸酯乙腈溶液,所述过氧化氢的溶液为0.1~0.5mM的过氧化氢乙腈溶液。
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