[发明专利]一种下颌骨髁突骨软骨修复支架材料及其制备方法

权利要求书

1.一种下颌骨髁突骨软骨修复支架材料，其特征在于，由软骨表层、软骨深层和骨层组成，所述软骨表层由交联巯基-透明质酸与I型胶原的复合水凝胶以及分布在该复合水凝胶中的骨髓间充质干细胞组成，软骨深层由交联巯基-透明质酸与I型胶原的复合水凝胶以及分布在该复合水凝胶中的软骨细胞组成，骨层为多孔双相磷酸钙陶瓷，软骨深层位于软骨表层与骨层之间以及骨层的多孔结构中将软骨表层与骨层连接为一体，所述软骨表层、软骨深层以及骨层的厚度比为1:（1.5~2）:（2~3），软骨表层的厚度为0.2~1 mm，所述交联巯基-透明质酸是由结构式如式（I）所示的巯基-透明质酸通过巯基之间形成二硫键的自交联反应形成，巯基-透明质酸中半胱氨的接枝率为30%~60%，

（I）。

2.根据权利要求1所述下颌骨髁突骨软骨修复支架材料，其特征在于，所述软骨表层中，交联巯基-透明质酸的含量为5~30mg/mL，I型胶原的含量为15~25mg/mL；所述软骨深层中，交联巯基-透明质酸的含量为5~30mg/mL，I型胶原的含量为15~25mg/mL。

3.根据权利要求1所述下颌骨髁突骨软骨修复支架材料，其特征在于，所述多孔双相磷酸钙陶瓷由羟基磷灰石与β-磷酸三钙组成，多孔双相磷酸钙陶瓷中，羟基磷灰石的含量为10 wt%~40 wt%。

4.根据权利要求3所述下颌骨髁突骨软骨修复支架材料，其特征在于，所述多孔双相磷酸钙陶瓷的孔隙率为60%~80%。

5.根据权利要求1至4中任一权利要求所述下颌骨髁突骨软骨修复支架材料，其特征在于，软骨深层中的软骨细胞组为异体来源或自体来源的原代软骨细胞，软骨表层中的骨髓间充质干细胞为异体来源或自体来源的原代骨髓间充质干细胞。

6.权利要求1至5中任一权利要求所述下颌骨髁突骨软骨修复支架材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将成型多孔双相磷酸钙陶瓷置于模具中；

（2）将巯基-透明质酸溶液与I型胶原溶液混匀，调节pH值至7.3~7.5，然后加入软骨细胞悬液并混匀，将所得含细胞的混合液注射至成型多孔双相磷酸钙陶瓷的上方，静置至凝胶状态即形成软骨深层；

（3）将巯基-透明质酸溶液与I型胶原溶液混匀，调节pH值至7.3~7.5，然后加入骨髓间充质干细胞悬液并混匀，将所得含细胞的混合液注射至软骨深层的上方，静置至凝胶状态即形成软骨表层，从模具中取出，得到下颌骨髁突骨软骨修复支架材料；

步骤（2）~（3）的操作在冰浴条件下进行，将巯基-透明质酸用α-MEM培养基溶解即得巯基-透明质酸溶液，在冰浴下将I型胶原用醋酸溶液溶解即得I型胶原溶液，巯基-透明质酸溶液与I型胶原溶液混匀所形成的混合液中，交联巯基-透明质酸的浓度为5~30 mg/mL，I型胶原的浓度为15~25 mg/mL。

7.权利要求6所述下颌骨髁突骨软骨修复支架材料的制备方法，其特征在于，步骤（2）中软骨细胞悬液的加入量应使步骤（2）所得含细胞的混合液中，软骨细胞的含量至少达到1×10⁵ cells/mL；步骤（3）中骨髓间充质干细胞悬液的加入量应使步骤（3）所得含细胞的混合液中，骨髓间充质干细胞的含量至少达到1×10⁵ cells/mL。

8.权利要求6或7所述下颌骨髁突骨软骨修复支架材料的制备方法，其特征在于，若步骤（3）制备的下颌骨髁突骨软骨修复支架材料无法立即使用，则将下颌骨髁突骨软骨修复支架材料置于软骨诱导培养基进行体外培养，体外培养期间每隔2~3天更换一次软骨诱导培养基。