[发明专利]一种测定苋菜红中未磺化芳族伯胺的方法

说明书

本发明涉及一种测定苋菜红中未磺化芳族伯胺的方法，所述的方法为比色法，将标准重氮化偶合溶液和试样重氮化偶合溶液分别置于比色皿中,在510nm波长处用分光光度计测定各自的吸光度Aa、Ab,以空白溶液作为参比溶液。该方法操作简便、专属性强、灵敏度高、重复性好。

技术领域

本发明涉及一种萘酚-磺酸类化合物，尤其涉及一种萘酚-磺酸类化合物的检测方法。

背景技术

苋菜红（carmine），1-(4'-磺基-1'-萘偶氮)-2-萘酚-6,8-二磺酸三钠盐，俗称丽春红4R，色素1号等，分子式为C20H11N2Na3O10S3·1.5H2O，结构式如下：

。

苋菜红为红色至深红色均匀颗粒或粉末，无臭。耐光性、耐酸性较好，耐热性强（105℃）、耐还原性差；耐细菌性较差。溶于水，水溶液呈红色；溶于甘油，微溶于酒精，不溶于油脂；最大吸收波长508nm±2nm。对柠檬酸、酒石酸稳定；遇碱变为褐色。

本品可用作药品或食品的着色剂，最大使用量为0.1g/Kg。

现有技术研究表明，在合成苋菜红的过程中，不可避免会生成一些杂质，其中就包括未磺化芳族伯胺。未磺化芳族伯胺，包括苯胺等。短期内皮肤吸收或吸入大量苯胺者先出现高铁血红蛋白血症，表现为紫绀，舌、唇、指（趾）甲、面颊、耳廓呈蓝褐色，严重时皮肤、黏膜呈铅灰色，并有头晕、头痛、乏力、胸闷、心悸、气急、食欲不振、恶心、呕吐，甚至意识障碍。高铁血红蛋白10%以上，红细胞中出现赫恩兹小体。可在中毒4天左右发生溶血性贫血。中毒后2-7天内发生毒性肝病。口服中毒出上述症状外，胃肠道刺激症状较明显。长期低浓度接触苯胺可引起高铁血红蛋白血症、溶血性贫血和肝、肾损害。

因为最终要施用到人体上，因此本领域对控制药物原料的质量控制有着非常严苛的要求，其中就包括控制药用辅料的质量。如前所述，苋菜红作为常用的药用辅料，检测其中杂质的含量对控制其质量有着重要的意义。现有技术中（如中国药典2020版四部）并没有披露具体的方法，因此，如何检测苋菜红中未磺化芳族伯胺的含量是一个亟待解决的技术难题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种测定苋菜红中未磺化芳族伯胺的方法，该方法操作简便、专属性强、灵敏度高、重复性好，可以用来检测日落黄的质量。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

所述的方法为比色法。

优选的，所述未磺化芳族伯胺以苯胺计。

优选的，所述的方法具体如下：

试样溶液的配制：称取2g苋菜红，于150mL烧杯中,加100mL水和5mL浓度为40g/L氢氧化钠溶液,在温水浴中搅拌至完全溶解；将此溶液移入分液漏斗中,少量水洗净烧杯；每次以50mL乙酸乙酯萃取两次,合并萃取液；以10mL浓度为4g/L氢氧化钠溶液洗涤乙酸乙酯萃取液,除去痕量色素；再每次以10mL盐酸溶液对乙酸乙酯溶液反萃取3次；合并该盐酸萃取液,然后用水稀释至100mL,摇匀；

标准对照溶液的配制：吸取2.0mL苯胺标准溶液至100mL容量瓶中,用盐酸溶液稀释至刻度,混合均匀；

重氮化偶合溶液的配制：吸取10mL试样溶液,移入透明洁净的试管中,浸入盛有冰水混合物的烧杯内冷却10min；在试管中加入1mL溴化钾溶液及0.5mL亚硝酸钠溶液,稍用力摇匀后仍置于冰水浴中冷却10min,进行重氮化反应；另取一个25mL容量瓶移入1mLR 盐溶液和10mL碳酸钠溶液；将上述试管中的苯胺重氮盐溶液加至盛有 R盐溶液的容量瓶中,边加边略振摇容量瓶,用少许水洗净试管一并加入容量瓶中,再以水定容；充分混匀后在暗处放置15min；

标准重氮化偶合溶液的制备：吸取10mL标准对照溶液,其余步骤同上；

空白溶液的配制：吸取10mL盐酸溶液、10mL碳酸钠溶液及1mLR 盐溶液于25mL容量瓶中,水定容；