[发明专利]一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺

权利要求书

1.一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于包括如下步骤：(1)溶解：将禽畜胆汁的胆酸粗品溶解在一定浓度的碱性溶液中；(2)沉淀：用沉淀剂絮凝沉淀；(3)过滤，除去不溶物；(4)用模拟移动床色谱分离提纯，将过滤后的溶液按照设定的参数进行分离，得到含有鹅去氧胆酸的萃取液和含有其他物质的萃余液；(5)后处理：萃取液经过浓缩、酸沉、烘干，最终得到纯度大于99.0％、回收率大于95％的鹅去氧胆酸精品。

2.根据权利要求1所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，其中禽畜胆汁来源于家禽、家畜；优选鸡胆膏、猪胆膏、鸭胆膏中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，用模拟移动床SMB色谱分离，分离柱共计7-25根树脂柱，可分为6个单元，每个单元包含1-7根树脂柱不等，每个单元分离过程包括以下3个步骤：

S1：精馏阶段，由第1到第6单元串联成一个环形运行，洗脱液从Desorbent口进入第1单元中，再注入第2单元中，再注入第3单元中，依次循环至第6单元，使得鹅去氧胆酸和杂质在六单元中分离展开，控制流速为2.0-2.4ml/min，时间为1000-1200s；

S2：解吸阶段，由第1-5单元串联运行，料液流向：Desorbent口→Raffinate口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元中，鹅去氧胆酸和杂质在五柱中进一步分离展开，当循环至第5单元时，由于猪去氧胆酸，熊去氧胆酸，胆石酸等杂质吸附能力弱，会随着洗脱液从第5单元柱子底部出口流出，而吸附能力较强的鹅去氧胆酸仍然留在柱中，控制流速为2.0-2.4ml/min，时间为218-240s；

S3：产物萃取/进料阶段，分为洗脱和进料两部分，两部分同时运行；

产物萃取阶段，随着系统运行，由第1单元运行，料液流向：Desorbent口→Extract口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元中，再由第1单元柱子底部Extract口排出强吸附组分鹅去氧胆酸，控制流速为2.0-2.4ml/min，时间为948-960s；

进料阶段，由第5单元柱子和第4单元柱子串联运行，料液流向Feed口→Raffinate口，均相混合原料经Feed口进入第4单元柱子中，第5单元底部Raffinate口排出吸附较弱的杂质，控制流速为0.5-0.8ml/min，时间为948-960s；

固定相模拟逆时针旋转，重复几个周期直至分离过程达到稳态，得到高纯度的鹅去氧胆酸萃取液。

4.根据权利要求1所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，其中步骤(2)中沉淀剂是甲醇、乙醇中的一种或者几种的混合溶液。

5.根据权利要求1所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，其中步骤(4)中SMB中所用的洗脱液选自甲醇、乙醇、丙酮中的一种或者几种的混合溶液。

6.根据权利要求3所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，其中步骤(4)中SMB中所用的填料为西安蓝晓科技新材料股份有限公司生产的弱极性吸附树脂，来源于专利CN111111261A中所描述的层析填料。

7.根据权利要求3所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，其中步骤(4)中SMB中所用的色谱柱的参数为：径高比为35-40:1，柱温为30-55℃。

8.根据权利要求3所述的一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，其特征在于，其中步骤(4)中SMB中所用的洗脱液的浓度是25-50％。

9.一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺，包括：取猪胆膏80g，加入400g的0.5mol/L的氢氧化钠水溶液；溶解后，加入300ml的甲醇，搅拌，絮凝沉淀，静置；用0.45μm的有机滤膜过滤，得均相的粗胆酸溶液480ml；SMB中装入弱极性吸附树脂，将粗胆酸溶液在SMB的Feed口进入，50％的甲醇作为洗脱液从Desorbent口入，在整个模拟移动床运行过程中，固定相和流动相通过逆流操作对样品进行分离纯化，分别得到鹅去氧胆酸(强保留组分)和杂质，每单元色谱柱的分离过程包括以下3个步骤：

S1：精馏阶段，由1-6单元串联成一个环形运行，洗脱液从Desorbent口进入第1单元中，再注入第2单元中，再注入第3单元中，依次循环至第6单元，使得鹅去氧胆酸和杂质在六柱中分离展开，控制流速为2.0ml/min，时间为1200s；

S2：解吸阶段，由第1-5单元串联运行，料液流向：Desorbent口→Raffinate口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元柱中，鹅去氧胆酸和杂质在五单元中进一步分离展开，当循环至第5单元时，由于杂质(猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、石胆酸及色素、蛋白等)吸附能力弱，会随着洗脱液从第5单元柱底部出口流出，而吸附能力较强的鹅去氧胆酸仍然留在柱中，控制流速为2.0ml/min，时间为240s；

S3：产物萃取/进料阶段，分为洗脱和进料两部分，两部分同时运行；

产物萃取阶段，随着系统运行，由第1单元运行，料液流向：Desorbent口→Extract口，洗脱液从Desorbent口进入第1单元柱中，再由第1单元柱底部Extract口排出强吸附组分鹅去氧胆酸，控制流速为2.0ml/min，时间为960s；

进料阶段，由第5单元柱和第4单元柱串联运行，料液流向Feed口→Raffinate口，均相混合原料经Feed口进入第4单元柱中，第5单元柱底部Raffinate口排出吸附较弱的杂质，控制流速为0.5ml/min，时间为960s；

固定相模拟逆时针旋转，重复几个周期直至分离过程达到稳态，得到高纯度的鹅去氧胆酸分离液，最后经过浓缩，再用1M稀酸调至pH＝3，静置，离心过滤，烘干，得纯度为99.8％(HPLC)的鹅去氧胆酸，鹅去氧胆酸回收率96.5％。