[发明专利]一种制备高纯度鹅去氧胆酸的新工艺

说明书

本发明提供一种利用模拟移动床色谱从禽畜类胆汁皂化粗品中分离纯化鹅去氧胆酸的方法，包括以下步骤：(1)溶解，将胆酸粗品溶解在一定浓度的氢氧化钠溶液中；(2)沉淀，用沉淀剂絮凝沉淀；(3)过滤，除去不溶物；(4)模拟移动床色谱分离：将过滤后的溶液按照设定的参数进行分离，得到含有鹅去氧胆酸的萃取液和含有其他物质如猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、石胆酸及色素、蛋白等的萃余液；(5)后处理：萃取液经过浓缩、酸沉、烘干，最终得到纯度大于99.0％，回收率大于95％的鹅去氧胆酸精品。本发明摒弃了传统工艺中的溶剂萃取、硅胶柱层析等工艺，采用模拟移动床色谱分离工艺，产品纯度高，回收率高，实现了连续生产。

技术领域

本发明属于医药用化合物分离纯化领域，具体地，涉及一种鹅去氧胆酸的提取方法，特别涉及一种用模拟移动床色谱分离工艺制备高纯度鹅去氧胆酸的方法。

背景技术

鹅去氧胆酸(简称CDCA)是动物胆汁的主要有效成分之一，被广泛的应用在医药行业。鹅去氧胆酸临床上药理作用有以下几个方面：

1、治疗胆固醇结石。CDCA能够抑制HMG-COA还原酶的活性，刺激胆酸合成、限制酶的活性，从而扩大胆汁酸池以利于胆固醇以微胶粒状态溶解。

2、抗菌作用。CDCA的体外抗菌试验结果表明CDCA对革兰氏阳性菌、金黄色葡萄球菌具有显著的抗菌作用。

3、抗炎作用。

4、解热作用。

CDCA是世界上用量最大的治疗胆结石药物，同时又是合成熊去氧胆酸和其它甾体化合物的原料，因此近年来对鹅去氧胆酸的提纯工艺研究的报道不少。CDCA传统的提取工艺是经过去除脂肪、加碱皂化、氯化钙沉淀、酸化，乙酸乙酯重结晶等步骤达到去除胆汁中的杂质与色素，从而得到较高纯度的CDCA。

2011年01月19日中国专利CN101948496A公开的“一种从家禽胆汁中萃取鹅去氧胆酸的方法”，是从新鲜或冷冻家禽胆汁中，利用皂化反应得到粗胆汁酸或粗胆汁酸钙盐，再将粗胆汁酸酯溶液与有机含氮化合物A水溶液共热，利用有机含氮化合物A来除去粗胆汁酸中的大部分亲水性杂质，得到的粗胆汁酸酯溶液与有机含氮化合物B反应，析出沉淀，过滤并进行脱色、精制等步骤后，可得纯度95％左右的鹅去氧胆酸。

专利CN201210175306.1公开的“大孔吸附树脂分离鸭胆汁中鹅去氧胆酸的方法”，其特征在于：第一步为微生物溶液制作：取动物回肠及大肠，刮出内容物；添加水稀释过滤得到滤液；滤液加入MRS培养基得培养液；分离培养液得沉淀物；加生理盐水混悬得微生物溶液；第二步为分离鸭胆汁中鹅去氧胆酸；取鸭胆汁，添加微生物溶液得混合液；混合液反应过滤出湿游离型胆汁酸；添加水稀释成稀释液，加入水饱和的硫酸镁或氯化钙反应得过滤得到游离型胆汁酸盐；加入甲醇或乙醇回流溶解游离型胆汁酸盐得溶解液，将溶解液置于装有大孔树脂的层析柱中，洗脱层析柱的鹅去氧胆酸溶液；鹅去氧胆酸溶液加入碳酸钠或氢氧化钠加热过滤，滤饼滤水洗至pH值中性，低温烘干就得到鹅去氧胆酸。该发明具有操作简单，生产设备通用性高，所用化学物质低毒的特点；但是不能实现连续生产。

专利CN201911111097.2,公开的“一种从猪胆膏中萃取鹅去氧胆酸的方法”，此方法包括了皂化、络合析晶、萃取酯化、乙酰化等步骤，达到了一次性分离猪胆膏中猪去氧胆酸、猪胆酸、鹅去氧胆酸的目的。该申请得到的三种产物的纯度高，试剂均为廉价易得，且大部分溶剂均可以回收套用，产生的废水较少。

但是，目前纯化鹅去氧胆酸的常规方法中，使用不同的有机溶剂萃取或重结晶，母液需要反复分离结晶，生产周期长。而且有的方法中得到的产品鹅去氧胆酸的纯度不够高，有的虽然生产工艺中使用的废水少，溶剂可以套用，但本发明使用SMB纯化得到高纯度的鹅去氧胆酸，适用于鹅去氧胆酸工业化的连续生产。我们去年申请的“一种层析填料、制备方法及其在鹅去氧胆酸分离纯化中的应用”专利中，在纯化鹅去氧胆酸时，该工艺成本低，但需要使用两个梯度的醇洗脱，洗脱体积大。

发明内容