[发明专利]一种基于Wnt-5A/Ror2信号通路的软骨细胞增殖方法

权利要求书

1.一种软骨细胞增殖及再生的方法，其特征在于，包括：

（1）将人关节软骨组织用95％乙醇消毒处理10分钟后，先用0.5％胰蛋白酶在37℃处理2小时，用磷酸缓冲液洗涤后，再用0.08％II型胶原酶消化；将完成消化的细胞用培养基1稀释后，离心收集细胞；用培养基 1离心洗涤，获取原代人软骨细胞，将制备获得的原代人软骨细胞用培养基1在二氧化碳培养箱中进行培养，培养条件为37℃，5％二氧化碳浓度，获得人软骨细胞，所述培养基1为DMEM培养基加10%胎牛血清制备；

（2）将步骤（1）制备的软骨细胞在培养基中培养，所述培养基包括基础培养基、浓度6%胎牛血清和细胞增殖制剂，所述细胞增殖制剂为芦荟大黄素和咖啡酸，所述芦荟大黄素的浓度为40μmol/L，所述咖啡酸的浓度为40μmol/L，所述基础培养基为DMEM培养基；

（3）对培养增殖的软骨细胞进行纯化，保存备用。