[发明专利]一种阿奇霉素有关物质的检测方法

权利要求书

1.一种阿奇霉素有关物质的检测方法，采用高效液相色谱法进行检测，其特征在于，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以流动相A和流动相B的混合液为流动相，通过梯度洗脱的方式对待测样品进行检测；

所用的色谱柱填料为Waters XBridge® Shield RP18，4.6mm×250mm，3.5μm或WatersXBridge® Shield RP18，4.6mm×150mm，2.5μm；

所述流动相A为水相与乙腈的混合溶液，所述流动相B为乙腈和甲醇的混合液；所述流动相A中，所述水相和乙腈的体积比为98:2；所述水相的制备：0.05mol/L的磷酸氢二钾溶液用20%磷酸溶液调节pH值至8.10~8.30；所述流动相B中，乙腈和甲醇的体积比为90:10；

所述梯度洗脱：以所述流动相的总体积为100%计，

0~5min，所述流动相A的体积分数维持在65%，所述流动相B的体积分数维持在35%；

5~45min，所述流动相A的体积分数由65%降低至32%，所述流动相B的体积分数由35%增加至68%；

45~65min，所述流动相A的体积分数维持在32%，所述流动相B的体积分数维持在68%；

65~70min，所述流动相A的体积分数由32%增加至65%，所述流动相B的体积分数由68%降低至35%；

70~80min，所述流动相A的体积分数维持在65%，所述流动相B的体积分数维持在35%；

其中所述方法检测阿奇霉素及其19种杂质，所述19种杂质为：

。

2.根据权利要求1所述的阿奇霉素有关物质的检测方法，其特征在于，所述水相的制备：0.05mol/L的磷酸氢二钾溶液用20%磷酸溶液调节pH值至8.20。

3.根据权利要求1所述的阿奇霉素有关物质的检测方法，其特征在于，在紫外检测波长为205~215nm的条件下进行检测。

4.根据权利要求3所述的阿奇霉素有关物质的检测方法，其特征在于，在紫外检测波长为208~212nm的条件下进行检测。

5.根据权利要求4所述的阿奇霉素有关物质的检测方法，其特征在于，在紫外检测波长为210nm的条件下进行检测。

6.根据权利要求3所述的阿奇霉素有关物质的检测方法，其特征在于，柱温为45~50℃。

7.根据权利要求6所述的阿奇霉素有关物质的检测方法，其特征在于，柱温为45~48℃。

8.根据权利要求1~7任一项所述的阿奇霉素有关物质的检测方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.7~0.9mL/min。

9.根据权利要求8所述的阿奇霉素有关物质的检测方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.8mL/min。

10.根据权利要求1~7任一项所述的阿奇霉素有关物质的检测方法，其特征在于，所述待测样品的溶剂稀释液为磷酸盐、甲醇和乙腈的混合液，磷酸盐、甲醇和乙腈的体积比为25~45：25~45：20~40；所述稀释液的pH为9~11；所述磷酸盐为磷酸二氢铵溶液。

11.根据权利要求10所述的阿奇霉素有关物质的检测方法，其特征在于，所述待测样品的溶剂稀释液为磷酸盐、甲醇和乙腈的混合液，磷酸盐、甲醇和乙腈的体积比为35:35:30；所述稀释液的pH为10.0。

12.根据权利要求10所述的阿奇霉素有关物质的检测方法，其特征在于，所述磷酸盐由磷酸二氢铵加水溶解、稀释，用氨试液调节pH值为10.0配制，磷酸二氢铵与水的质量体积比为1.73g：1000ml。