[发明专利]一种人干扰素-κ突变体及其制备方法

权利要求书

1.一种人干扰素kappa(hIFN-κ)突变体，其特征在于，将天然存在的hIFN-κ的氨基酸序列中第166位的半胱氨酸突变为不能形成二硫键的氨基酸残基。

2.根据权利要求1所述的突变体，其特征在于，在所述突变体中，

1)天然存在的hIFN–κ的对应于SEQ ID NO:1中第166位置上的半胱氨酸替换为20种天然氨基酸中的除半胱氨酸外的其他19种氨基酸中的任一种，优选为丝氨酸；或

2)来源于人且与SEQ ID NO:1具有99％同源性的氨基酸序列的对应于SEQ ID NO:1的第166位的半胱氨酸替换为20种天然氨基酸中的除半胱氨酸外的其他19种氨基酸中任一种，优选为丝氨酸；或

3)所述hIFN-κ突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

3.一种编码如权利要求1或2所述的突变体的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。

4.一种核酸构建体，其特征在于，所述核酸构建体包含权利要求3所述的核苷酸序列；优选地，所述核酸构建体为载体；更优选地，所述载体为质粒载体；最优选地，所述质粒载体选自pET28a、pET30a、pCZN1、pET22b、pET20b和pET-11c的任意一种。

5.一种重组的基因工程细胞，其特征在于，所述基因工程细胞包含权利要求3所述的核酸分子或包含权利要求4所述的核酸构建体；优选地，所述基因工程细胞为表达产生所述hIFN-κ突变体的原核宿主细胞；优选地，所述原核宿主细胞为来自细菌的细胞；更优选地，所述原核宿主细胞为枯草芽孢杆菌细胞或大肠杆菌细胞；最优选地，所述原核宿主细胞为大肠杆菌BL21(DE3)的细胞。

6.一种制备hIFN–κ突变体的方法，其特征在于，所述hIFN–κ突变体通过培养权利要求5所述的基因工程细胞获得。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，包括：

1)培养所述基因工程细胞，添加IPTG进行诱导表达；

2)离心收集菌体，超声破碎后收集包涵体；

3)盐酸胍复性收集获得hIFN-κ突变体；

4)利用层析纯化获得蛋白。

8.权利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法还包括检测获得的hIFN-κ突变体与受体结合的亲和力以及体外的细胞活性。

9.一种药物组合物，其包含如权利要求1或2所述的hIFN-κ突变体。

10.权利要求1或2所述的hIFN-κ突变体在制备治疗病毒感染或肿瘤方面的药物中的应用。