[发明专利]一种外泌体冻存保护液及其制备方法有效
申请号: | 202011560330.8 | 申请日: | 2020-12-25 |
公开(公告)号: | CN112514892B | 公开(公告)日: | 2022-06-14 |
发明(设计)人: | 陈海佳;王小燕;姜交华;刘志敏;陈东煌 | 申请(专利权)人: | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司;广东国科细胞科技有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 潘颖 |
地址: | 510300 广东省广州市开发区广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 外泌体冻存 保护 及其 制备 方法 | ||
1.一种外泌体冻存保护液,其特征在于,包括:含NaCl、KCl的Tris-HCl缓冲溶液、葡萄糖、CD-Lipid浓缩液、人血清白蛋白溶液、聚乙烯醇;
以重量份计,外泌体冻存保护液中各组分的用量为:
2.根据权利要求1所述的外泌体冻存保护液,其特征在于,以重量份计,外泌体冻存保护液中各组分的用量为:
3.根据权利要求1所述的外泌体冻存保护液,其特征在于,所述含NaCl、KCl的Tris-HCl缓冲溶液中,Tris-HCl的摩尔浓度为10~50mM,NaCl的摩尔浓度为80~200mM,KCl的摩尔浓度为1~5mM;所述含NaCl、KCl的Tris-HCl缓冲溶液的pH值为7.0~8.0。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的外泌体冻存保护液,其特征在于,所述含NaCl、KCl的Tris-HCl缓冲溶液中,Tris-HCl的摩尔浓度为25mM,NaCl的摩尔浓度为137mM,KCl的摩尔浓度为2.5mM;所述含NaCl、KCl的Tris-HCl缓冲溶液的pH值为7.4。
5.权利要求1至4中任一项所述外泌体冻存保护液的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将NaCl、KCl加入到Tris-HCl缓冲溶液中,得到含NaCl、KCl的Tris-HCl缓冲溶液;
将所述含NaCl、KCl的Tris-HCl缓冲溶液、葡萄糖、聚乙烯醇、CD-Lipid浓缩液和人血白蛋白溶液混合,制得外泌体冻存保护液。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述混合之前还包括将各组分采用滤膜进行过滤的操作。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述滤膜的孔径为0.2~0.3μm。
8.根据权利要求6或7所述的制备方法,其特征在于,所述滤膜的孔径为0.22μm。
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