[发明专利]热稳定性和活性增强的烟酰胺核糖激酶突变体及其编码基因和应用有效
| 申请号： | 202011561179.X | 申请日： | 2020-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN112553178B | 公开（公告）日： | 2023-03-10 |
| 发明（设计）人： | 戴维;周嘉莹;余允东;刘慧;徐广见 | 申请（专利权）人： | 中山俊凯生物技术开发有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/30;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人： | 张黎 |
| 地址： | 528437 广东省中山市火*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 热稳定性 活性 增强 烟酰胺 核糖 激酶 突变体 及其 编码 基因 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种烟酰胺核糖激酶突变体，其特征在于，所述的烟酰胺核糖激酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.权利要求1所述的烟酰胺核糖激酶突变体的编码基因，其特征在于，所述的烟酰胺核糖激酶突变体的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.含有权利要求2所述的编码基因的载体。
4.根据权利要求3所述的载体，其特征在于，所述的载体为pET 表达载体、pCW表达载体、pUC表达载体或pPIC9k表达载体。
5.含有权利要求2所述的编码基因的宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞为大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌或毕赤酵母。
6.权利要求1所述的烟酰胺核糖激酶突变体、权利要求2所述的编码基因、权利要求3或4所述的载体、或权利要求5所述的宿主细胞在制备β-烟酰胺单核苷酸中的应用。
7.一种制备β-烟酰胺单核苷酸的方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：
S1.配置反应体系，包含：0.1-5g/L权利要求1所述的烟酰胺核糖激酶突变体，50mMpH6.5磷酸钠缓冲液，10mM ATP，10-100g/L烟酰胺核糖，50mM六偏磷酸钠，50mM七水硫酸镁；控制反应体系温度在42℃，进行搅拌反应；
S2.反应3h后进行HPLC检测；经过纯化后得β-烟酰胺单核苷酸。
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