[发明专利]一种噁拉戈利钠中化合物I含量的测定分析方法

说明书

本发明公开了一种噁拉戈利钠中2‑氟‑3‑甲氧基苯硼酸含量的测定分析方法，该方法通过与N‑甲基亚氨基二乙酸衍生后测定2‑氟‑3‑甲氧基苯硼酸衍生物含量，从而测定出噁拉戈利钠中2‑氟‑3‑甲氧基苯硼酸的含量。该分析方法与现有技术相比具有专一性好,重现性好，灵敏度极高，适合做痕量分析等特点。

技术领域

本发明涉及用高效液相色谱-质谱联用仪通过与N-甲基亚氨基二乙酸(以下简称衍生剂)衍生后测定2-氟-3-甲氧基苯硼酸衍生物(以下简称化合物I衍生物)含量，从而测定出噁拉戈利钠中2-氟-3-甲氧基苯硼酸(以下简称化合物I)的含量。此方法能较好的控制原料药及制剂中痕量化合物I含量，为患者的健康安全用药提供保障，属于医药技术领域。

技术背景

噁拉戈利钠，化学名R-4-((2-(5-(2-氟-3-甲氧基苯基)-3-((2-氟-6-(三氟甲基)苄基)-4-甲基-2,6-二氧代-2,3-二氢嘧啶-1(6H)-基)-1-苯乙基)氨基)丁酸钠。

噁拉戈利钠(elagolix sodium)是由艾伯维(Abbvie)与合作伙伴NeurocrineBiosciences共同研发的一种口服GnRH拮抗剂，通过抑制脑垂体促性腺释放激素受体，最终降低血循环中性腺激素水平。结构如下：

噁拉戈利钠中含有反应残留的化合物I，结构如下：

准确定量地测定噁拉戈利钠中痕量的化合物I含量极具挑战性。很难采用气相、液相色谱等对其进行痕量直接测定。

目前，只有测定常量化合物I含量的方法，采用经典的色谱法,其专一性、灵敏度、方法精密度和重复性都存在很大的缺陷，不能提供可靠的痕量分析结果。为了克服原方法的缺陷，本发明采用高效液相色谱-质谱联用仪通过与衍生剂衍生后测定噁拉戈利钠中化合物I的含量。该分析方法具有操作简单、专一性好、灵敏极高、重现性好等特点。

发明内容

如上所述，直接准确定量测定痕量化合物I存在各种缺陷。然而,利用化合物I与衍生剂反应活性高，反应条件温和，及衍生物具有稳定性强和非常适合反相液相色谱分离的特征，以及在质谱检测器中很容易离子化并具有稳定的适合定量分析的分子结构的特点，可以采用高效液相色谱-质谱联用仪测定。除此之外化合物I在质谱检测器有灵敏的响应这一特征使本方法的灵敏度和专一性大大提高。

衍生剂N-甲基亚氨基二乙酸结构如下：

化合物I与衍生剂N-甲基亚氨基二乙酸生成化合物I衍生物反应路线如下：

通过试验发现噁拉戈利钠在二甲亚砜中有非常好的溶解性，且化合物I与衍生剂在酸性二甲亚砜中反应效率高，条件温和易操作。本发明将用二甲亚砜作为稀释剂。

本发明涉及一种噁拉戈利钠中化合物I含量的测定分析方法，该方法为将化合物I与衍生剂反应，通过用高效液相色谱-质谱联用仪测定化合物I衍生物的含量，从而间接地测定噁拉戈利钠中化合物I的含量。

上述样品配制中用10％乙酸的二甲亚砜溶液作为稀释液。

上述采用高效液相色谱-质谱联用仪，选择正离子离子模式。

该方法包括以下几个步骤：

(1)取噁拉戈利钠原料药或制剂粉末，以5％至30％甲酸或乙酸或三氟乙酸的二甲亚砜或N，N-二甲基甲酰胺溶液作为稀释液制备得到样品储备溶液；

(2)取衍生剂N-甲基亚氨基二乙酸固体，以5％至30％甲酸或乙酸或三氟乙酸的二甲亚砜或N，N-二甲基甲酰胺溶液作为稀释液制备得到衍生剂溶液；