[发明专利]一种鸭甲型肝炎二价活疫苗效力检验方法在审
| 申请号： | 202011565934.1 | 申请日： | 2020-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN113832256A | 公开（公告）日： | 2021-12-24 |
| 发明（设计）人： | 卢凤英;张小飞;吴凤瑶;赵莎;刘青涛;沈丽雅 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N7/00;C12R1/93 |
| 代理公司： | 南京钟山专利代理有限公司 32252 | 代理人： | 王楠 |
| 地址： | 210014*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鸭甲型 肝炎 二价 疫苗 效力 检验 方法 | ||
1.一种鸭甲型肝炎二价活疫苗效力检验方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、取待检二价活疫苗，接种7~9日龄鸡胚，所述二价活疫苗同时含有血清1型鸭甲型肝炎弱病毒A66株和血清3型鸭甲型肝炎弱病毒HuB60株；
S2、弃去接种后24h内死亡的鸡胚，收集接种后24h~120h所有鸡胚胚体；
S3、将S2中收集的鸡胚胚体进行总RNA提取，利用RT-PCR方法分别确定两种病毒对鸡胚的感染阳性数量，判定其半数感染量EID50。
2.根据权利要求1所述的鸭甲型肝炎二价活疫苗效力检验方法，其特征在于，S1具体为：取待检二价活疫苗进行10倍系列稀释，取相应稀释度，将每个稀释度的待检二价活疫苗分别通过接种7~9日龄SPF鸡胚。
3.根据权利要求1所述的鸭甲型肝炎二价活疫苗效力检验方法，其特征在于，S2具体为：逐日照胚，将接种后24h内死亡的鸡胚弃去，将接种后24h~120h死亡的鸡胚置4℃冰箱暂存，至120h后取出所有鸡胚。
4.根据权利要求1所述的鸭甲型肝炎二价活疫苗效力检验方法，其特征在于，S3具体为：将S2中收集的鸡胚胚体，通过总RNA提取，利用DHAV-1特异性引物和DHAV-3特异性引物分别对7~9日龄接种组鸡胚组织进行RT-PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳后，统计PCR阳性数，计算两种抗原的鸡胚半数感染量EID50。
5.一种根据权利要求1 所述的血清1型鸭甲型肝炎弱病毒A66株，其特征在于，保藏编号为：CGMCC No.8020。
6.一种根据权利要求1 所述的血清3型鸭甲型肝炎弱病毒HuB60株，其特征在于，保藏编号为： CGMCC No.10307。
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