[发明专利]一种ω-转氨酶的应用及生物酶法去消旋化制备L-草铵膦的方法有效
| 申请号： | 202011569978.1 | 申请日： | 2020-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN112553285B | 公开（公告）日： | 2022-10-28 |
| 发明（设计）人： | 杨立荣;王子渊;周海胜;张红玉;许金玲;吴坚平 | 申请（专利权）人： | 浙江大学杭州国际科创中心 |
| 主分类号： | C12P41/00 | 分类号： | C12P41/00;C12P13/00;C12P9/00 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈金龙 |
| 地址： | 311215 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 转氨酶 应用 生物酶 法去消旋化 制备 草铵膦 方法 | ||
1.一种ω-转氨酶在催化D-草铵膦转化为2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸中的应用，所述ω-转氨酶的NCBI登录号为AAA22252.1，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种ω-转氨酶的编码基因在催化D-草铵膦转化为2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸中的应用，ω-转氨酶的NCBI登录号为AAA22252.1，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.一种生物酶法去消旋化制备L-草铵膦的方法，以D，L-草铵膦为原料，经酶催化体系催化获得L-草铵膦，其特征在于，所述酶催化体系包括：用于将D-草铵膦转化为2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸的ω-转氨酶，以及用于将2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸转化为L-草铵膦的谷氨酸脱氢酶，
所述ω-转氨酶的NCBI登录号为AAA22252.1，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述谷氨酸脱氢酶选自：
(1)NCBI登录号为BAM47507.1的谷氨酸脱氢酶经A145G/V359A两个位点定点突变后的突变体；
(2)NCBI登录号为NP_742836.1的谷氨酸脱氢酶。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，反应体系还包括辅酶再生系统，辅酶再生系统所用的辅酶再生酶为醇脱氢酶。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述醇脱氢酶选自：
(1)NCBI登录号为WP_077844196.1的醇脱氢酶；
(2)NCBI登录号为AB125900的醇脱氢酶。
7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，辅酶再生系统还包括NADH与NAD+，或者NADPH与NADP+。
8.如权利要求5所述的方法，其特征在于，辅酶再生系统以异丙醇为辅酶再生底物，异丙醇在辅酶再生过程中被催化生成丙酮，所述ω-转氨酶，在将D-草铵膦转化为2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸时，消耗作为辅底物的丙酮生成异丙胺。
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