[发明专利]一种磁珠法核酸提取液及其制备方法

权利要求书

1.一种磁珠法核酸提取液，其特征在于，包括改性的壳聚糖包覆的磁珠、结合液、洗涤液和洗脱液；所述改性的壳聚糖包覆的磁珠为经过聚合氯化铝改性的壳聚糖包覆的磁珠。

2.根据权利要求1所述的提取液，其特征在于，制备所述经过聚合氯化铝改性的壳聚糖的材料包括以下重量份的各组分：

壳聚糖8-10份、乙酸8-10份、聚合氯化铝8-10份、氯化钙1-3份、水800-1000份。

3.根据权利要求1或2所述的提取液，其特征在于，所述结合液为氯化钠和PEG6000的水溶液；

优选地，所述结合液中氯化钠的浓度为1.5-2.5M，PEG6000的浓度为8-12wt％。

4.根据权利要求1-3任一所述的提取液，其特征在于，所述洗涤液为乙醇水溶液，优选为60-65v/v％的乙醇水溶液。

5.根据权利要求1-4任一所述的提取液，其特征在于，所述洗脱液为TE缓冲液，其中，Tris-HCl的浓度为10-15mM，EDTA的浓度为1mM，pH为8.0-8.5。

6.根据权利要求1-5任一所述的提取液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，制备经过聚合氯化铝改性的壳聚糖；

S2，制备经过聚合氯化铝改性的壳聚糖包覆的磁珠。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，S1步骤中，包括以下步骤：

S11，混合水和氯化钙，搅拌；

S12，加入混合好的壳聚糖和乙酸，搅拌；

S13，加入聚合氯化铝，混合，搅拌，室温吸附2-3h；

S14，喷雾干燥，得到固体粉末。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，S2步骤中，包括以下步骤：

S21，四氧化三铁颗粒和水混合，超声，得到混合液A；

S22，经过聚合氯化铝改性的壳聚糖、乙二醛和乙酸水溶液混合，搅拌，得到混合液B；

S23，混合液A和混合液B混合，室温下搅拌6-8h；

S24，干燥；

其中，S21和S23在体系中通入氮气，S24在氮气气氛下进行干燥。

9.根据权利要求7-8任一所述的方法，其特征在于，S12步骤中，制备所述经过聚合氯化铝改性的壳聚糖的材料中，氯化钙的含量C通过以下公式确定：

其中，a为壳聚糖的含量，b为常数，5≤b≤12。

10.根据权利要求7-9任一所述的方法，其特征在于，S21步骤中，对四氧化三铁颗粒和水混合液进行超声处理后的均一度进行齐次检验，判断是否合格，包括以下步骤：

S21，四氧化三铁颗粒和水混合，超声处理3-5min；重复一次；

S22，分别用向量X1和X2表示超声处理一次和超声处理两次的混合液均一度；

S23，用下列公式计算向量的稳定度：

向量X1的稳定度为

向量X2的稳定度为

其中，

S24，如果大于3.02，则判定混合液的均一度不合格，继续重复超声一次，直至合格。