[发明专利]卡比多巴对映异构体的分离制备方法

说明书

本发明公开了一种卡比多巴对映异构体的分离制备方法，采用逆流色谱法进行分离，包括以下步骤：将正丁醇：乙酸乙酯：水按照4:0.8～1.2:4.5～5.5的体积比配制后倒入分液器中，分别得上相和下相；将手性试剂溶于上相，所得的手性试剂溶液与下相混合，得混合剂；将D,L‑卡比多巴溶于混合剂中，得到D,L‑卡比多巴溶液；将上相注入逆流色谱仪分离柱内作为固定相，将D,L‑卡比多巴溶液注入逆流色谱仪的进样环中，开启逆流色谱仪，注入下相作流动相，分别得到L‑卡比多巴和D‑卡比多巴。采用本发明方法分离得到的两种卡比多巴对映异构体纯度可达到95％以上。

技术领域

本发明属于药物外消旋体拆分研究技术领域，具体涉及卡比多巴对映异构体的分离制备方法，特别是采用高速逆流色谱法手性分离卡比多巴对映异构体。

背景技术

世界开发的新药中有三分之一均是手性药物，药物对映异构体(左旋以及右旋)的结构不同导致了与受体的不同亲和力，从而有不同的活性。对映异构体的不同对药物的活性有三个方面的影响：

(1)使左旋和右旋具有不同的活性，如奎宁是抗疟疾药，而奎尼丁是治疗心律失常；

(2)使左旋和右旋活性具有不同差异，如左氧氟沙星抗菌活性是右旋的20倍；

(3)使左旋和右旋具有不同的不良反应，如著名的反应停事件，是因为在药物生产过程中没有将左旋右旋拆分干净，右旋有胎儿致畸的不良反应。因而当开发药物为外消旋体时，必须对两种对映异构体进行研究并证明它们都无任何毒副作用或低毒作用，才可使用。

卡比多巴(Carbidopa)是一个具有较强作用的外周多巴胺脱羧酶抑制剂，白色绒毛状结晶；几乎无臭。常与左旋多巴联合使用，用于治疗帕金森病和帕金森综合征。分子量为244.24Da，分子式为C₁₀H₁₄N₂O₄。卡比多巴具有两种的对映异构体，分别为L-卡比多巴和D-卡比多巴，化学结构如式I所示：

目前关于此类化合物的手性拆分方法研究较少。根据开发立体异构新药的技术要求及确保药物的安全、有效，需要对手性起始原料的所有光学异构体进行检测。因此，对D,L-卡比多巴手性拆分建立一种快速、有效的方法，是一个具有理论及实际意义的课题。

色谱分离法具有非常优秀的分辨能力，手性拆分属于色谱研究领域的热点和前沿，但其主要局限在高效毛细管电泳、毛细管气相色谱、高效液相色谱领域。虽然这3种方法分辨率很高，但其分离量常在微克级，只能作为分析测试手段。制备液相色谱满足一般性制备拆分的需要，可用于药理及毒理实验，但手性制备柱价格可高达几万到数十万元，且大进样量严重影响柱的寿命；另外每种柱的适应范围也有限，这就造成手性制备的成本很高，即使制备较少量的手性物质，很多研究工作者都难以承受。由于逆流色谱具有制备性拆分的特点，因此，进行逆流色谱的手性分离研究具有积极的意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种拆分卡比多巴对映异构体的方法，以便于加深D,L-卡比多巴异构体的研究和利用。

本发明以D,L-卡比多巴为拆分对象，以(R)-(-)-2-氨基-1-丁醇作为手性试剂，将其添加到有机相中，用逆流色谱法得到D-卡比多巴和L-卡比多巴。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种卡比多巴对映异构体的分离制备方法(即，从D,L-卡比多巴对映异构体中分离制备卡L-比多巴和D-比多巴的方法)，采用逆流色谱法进行分离，包括以下步骤：

1)、将正丁醇：乙酸乙酯：水按照4:0.8～1.2:4.5～5.5的体积比配制后倒入分液器中，形成互不相溶的两相溶剂，分离后，分别得上相和下相；

2)、将作为手性试剂的(R)-(-)-2-氨基-1-丁醇溶于上相，配制成手性试剂浓度18～27mmol/L的手性试剂溶液；