[发明专利]一种丙戊酸钠原料中微量杂质HPLC-MS定性分析方法

说明书

本发明提供一种丙戊酸钠原料中微量杂质HPLC‑MS定性分析方法，本发明公开了一种丙戊酸钠原料中微量杂质HPLC‑MS定性分析的分析方法。本方法采用高效液相‑质谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Phenomenex synergi hydro‑RP4.6×250mm×4μm)，流速为1.0ml/min，能有效分离和定性分析丙戊酸钠原料中微量杂质的结构。

技术领域

本发明涉及测定药物微量杂质定性分析的技术领域，特别涉及一种丙戊酸钠原料中微量杂质HPLC-MS结构定性分析方法。

背景技术

丙戊酸钠化学名为2-丙基戊酸钠，分子式：C₈H₁₅NaO₂；1963年由法国Meurier首次证实有抗癫痫作用，1977年我国试制成功。丙戊酸钠为一种不含氮的广谱抗癫痫药。本品对多种方法引起的惊厥，均有不同程度的对抗作用。对人的各型癫痫如对各型小发作、肌阵挛性癫痫、局限性发作、大发作和混合型癫痫均有效。口服吸收快而完全，主要分布在细胞外液，在血中大部分与血浆蛋白结合。多用于其它抗癫痫药无效的各型癫痫病人，尤以小发作为最佳。

丙戊酸钠的作用机制与抑制电压敏感性钠离子通道有关。它通过抑制γ-氨基丁酸代谢，增加脑内的γ-氨基丁酸聚积，达到抑制病灶神经元过度放电以及异常放电扩散的效果。

目前常规的微量杂质定性分析多采用杂质对照品相对保留时间定性分析，由于在液相色谱中拥有相同保留时间的物质不一定为同一物质，存在一定的缺陷，因此需采用HPLC-MS能辅助杂质的结构定性分析；目前HPLC-MS大多用于纯度较高物质的结构定性确认；对于主成分中含有微量杂质特别是对主成分中含量小于0.1％的杂质定性测定难度较大，本发明提供了一种稳定的、能准确定性分析丙戊酸钠原料中微量杂质的方法。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种测定准确、灵敏度高的分析方法，可应用于丙戊酸钠原料微量杂质的结构定性分析。

本发明人经过色谱条件和质谱条件进行筛选，兼顾杂质分离的需要以及达到检测灵敏度要求，最终建立了适宜的杂质定性分析方法。

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Phenomenex synergi hydro-RP 4.6×250mm×4μm)。

流动相A为1.0mmol/L乙酸铵溶液(调pH4.5)，流动相B为甲醇。

梯度洗脱程序为：

柱温30℃。

雾化温度300℃，离子传输管温度300℃。

正离子电压3000V，负离子电压-1000V。

采用DAD全波长扫描。

流速1.0ml/min。

取丙戊酸钠原料适量制成含5mg/ml的溶液，作为供试品溶液。

供试品溶液进样量为10μl。

附图说明

图1为采用本发明的空白溶剂色谱图；

图2为采用本发明的丙戊酸钠样品溶液稀释200倍的杂质测定色谱图；

图3为采用本发明的丙戊酸钠160402样品溶液的杂质测定色谱图；

图4为采用本发明的丙戊酸钠190306样品溶液的杂质测定色谱图；

具体实施方式

为了准确定性丙戊酸钠原料中微量杂质，本发明提供了一种确定丙戊酸钠原料中微量杂质定性分析的方法，以下结合附图具体说明本发明的技术方案。

试剂：甲醇、乙酸、乙酸铵

对照品：EP杂质B、EP杂质L

样品：丙戊酸钠(批号：190306、160402)

样品溶液：取丙戊酸钠约50mg，精密称定，用水溶解并定量稀释至10ml。

对照溶液：精密量取50μl样品溶液，加水定量稀释至10ml，作为200倍稀释对照溶液。

空白溶液：水。