[发明专利]一种CRISPR系统及其在高山被孢霉中的应用在审
| 申请号： | 202011576687.5 | 申请日： | 2020-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN112592926A | 公开（公告）日： | 2021-04-02 |
| 发明（设计）人： | 陈海琴;王顺贤;常璐璐;张灏;陈永泉;陈卫 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/55 | 分类号： | C12N15/55;C12N15/80;C12N15/90;C12N15/53;C12N1/15;C12R1/645 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇钰莹 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 crispr 系统 及其 高山 被孢霉 中的 应用 | ||
1.一种核酸酶LbCpf1编码基因，其特征在于，含有SEQ ID NO.1所示的序列。
2.含有权利要求1所述核酸酶LbCpf1编码基因的表达载体。
3.根据权利要求2所述的表达载体，其特征在于，是组成型表达载体或诱导型表达载体。
4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，诱导型表达载体含有诱导型启动子Pcbh1。
5.含有权利要求2～4任一所述表达载体，或基因组上整合有权利要求1所述核酸酶LbCpf1编码基因的重组丝状真菌细胞。
6.根据权利要求5所述的重组丝状真菌细胞，其特征在于，以高山被孢霉为宿主。
7.一种基于CRISPR技术的丝状真菌系统，其特征在于，含有用于产生引导链CrRNA的表达载体，和表达SEQ ID NO.1所示核酸酶LbCpf1基因的高山被孢霉。
8.一种基因编辑方法，其特征在于，应用CRISPR技术对权利要求6所述重组丝状真菌细胞进行基因编辑；步骤包括：
(1)构建含有核酸酶LbCpf1和筛选标记的质粒；构建含有启动子、引导链和终止子的引导链质粒；
(2)采用根癌农杆菌将步骤(1)构建的质粒转化至高山被孢霉尿嘧啶营养缺陷型菌株中；
(3)利用筛选标记，从培养物中分离出所述的基因组发生编辑的宿主细胞。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述的根癌农杆菌为根癌农杆菌AGL1。
10.一种在高山被孢霉中进行多基因表达的方法，其特征在于，将含有外源基因的质粒导入至权利要求6所述的重组高山被孢霉工程菌株中，使外源基因整合在高山被孢霉基因组上后表达。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江南大学，未经江南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202011576687.5/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种动力电池快速脱离系统及方法
- 下一篇：一种自行车花鼓及其高精度成型工艺
