[发明专利]一种可消除羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的肌酐试剂盒的制备方法

说明书

本发明的一种可消除羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的肌酐试剂盒的制备方法的制备方法，其技术方案要点是包括如下步骤：制备R1试剂：称取缓冲液→加入防腐剂→加入漆酶或铬酸盐或铁酸盐或五氧化二钒，搅拌1小时→以IN盐酸或氢氧化钠(或氢氧化钾)调至PH8.0→加入Trinder’s反应剂A→非离子表面活性剂→加入BSA重量比0.1％→搅拌1小时→放入2～8℃隔夜→再加入肌酸酶，肌氨酸氧化酶，过氧化物酶，抗坏血酸氧化酶搅拌1小时→检测后获得；所述的Trinder’s反应剂A为4－氨基安替比林；制备R2试剂；本发明克服现在各医院临床检验测定肌酐时，由于血清标本中含羟苯磺酸钙、酚磺乙胺造成的负偏差，使肌酐测定时不准确的缺陷，适用于全自动生化分析仪血清肌酐的检测。

本案为分案申请，具体为申请号：2020108215100，名称为：一种可消除羟苯磺酸钙，酚磺乙胺的肌酐试剂盒及其制备方法，申请日为：2020.08.15的分案申请。

【技术领域】

本发明属于医学检验技术领域，本发明涉及一种可消除羟苯磺酸钙、酚磺乙胺药物干扰的肌酐试剂盒的制备方法。

【背景技术】

肌酐为临床检验上肾功能的主要指标及检测项目，测定血清肌酐的方法主要有两种：一种是碱性苦味酸速率法(Jaffe法)，一种是肌氨酸氧化酶法；Jaffe法由于线性范围窄，特异性差，易受样本中其他物质(如酮体、抗坏血酸、胆红素、头孢、多巴胺等)干扰，出现检测偏差，已逐渐退出市场。目前市场使用较多的为肌氨酸氧化酶法，此法已被各医院逐渐淘汰弃用改由肌氨酸氧化酶法检测，其检测原理如下：

现行市售检测试剂盒均为双试剂，试剂R1内含肌酸酶，肌氨酸氧化酶先将血清中之肌酸分解产生H₂O₂，再以过氧化物酶及Trinder’s试剂与形成的H₂O₂反应生产无色化合物，或以过氧化氢酶用来消除血清肌酸产生的H₂O₂，将生成的H₂O₂分解成水和氧，然后加入R2试剂，R2试剂里含肌酐酶及另一种Trinder’s试剂，及叠氮钠，肌酐酶将肌酐水解成肌酸再由R1里的肌酸酶，肌氨酸氧化酶，过氧化物酶及Trinder’s试剂之4-AAP及另一种Trinder’s试剂苯酚类化合物共同存在下呈色进行测定，试剂R1里如含过氧化氢酶则被试剂R2内之叠氮钠反应掉，此反应过程均利用了酶的专一性，但生成的H₂O₂为强氧化剂，极易被血清中的还原性药物消耗而产生负干扰。

肌酐作为肾功能最重要的指标，在肾病造成的微血管病变治疗及保护上常用的羟苯磺酸钙常用药具极强的还原性可与H₂O₂直接反应，消耗掉H₂O₂；另在常用于预防及治疗外科手术出血过多的常用药酚磺乙胺，亦具有强的还原性，此两种药物均会消耗现今医院常用的肌酐酶法测定时产生的H₂O₂，造成肌酐值会有严重的负偏差，造成医师诊断治疗时的误判。

羟苯磺酸钙和酚磺乙胺对肌氨酸氧化酶法检测肌酐的负干扰对被施用这两种药物的患者造成很大的不便。例如，对于糖尿病患者而言，常伴发肾功能不全，而所施用的羟苯磺酸钙对肌氨酸氧化酶法检测肌酐的负干扰可能造成糖尿病患者肾功能不正确评估，掩盖并延误病情。而对于手术患者，所施用的酚磺乙胺对肌氨酸氧化酶法检测肌酐的负干扰可能使得不能正确评估其肾功能，造成术后并发症，影响患者的术后恢复。

【发明内容】