[发明专利]一种百合的活体保存方法有效
申请号: | 202011579570.2 | 申请日: | 2020-12-28 |
公开(公告)号: | CN112450208B | 公开(公告)日: | 2022-04-29 |
发明(设计)人: | 马怀林;张跃华;贾振宇;高俊刚;刘思泱;刘亚玲;高旭;屈璐璐;王乌恩巴图 | 申请(专利权)人: | 内蒙古蒙草生态环境(集团)股份有限公司 |
主分类号: | A01N3/00 | 分类号: | A01N3/00;A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 010070 内蒙古*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 百合 活体 保存 方法 | ||
1.一种百合的活体保存方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤1:选取直径3-10cm的百合种球,剥取种球外层鳞片作为活体保存的外植体;
步骤2:对外植体进行灭菌处理,在超净台上,将外植体放入无菌容器中,用75%的酒精浸泡1-3min,取出外植体,然后用无菌水冲洗4-5次,再用0.1-0.2%HgCl2溶液浸泡15-25min,随后用无菌水冲洗4-5次,每次冲洗3min,最后无菌滤纸吸干水分;
步骤3:将灭菌处理后的外植体置入准备好的保存培养基中活体保存;
所述保存培养基为:
改良MS+肌醇0.15-0.35g/L+甘露醇400-700mg/L+硝酸银0.2-0.6mg/L
改良MS配方为:大量元素含量减少40%-60%,其余成分不变;
所述活体保存条件为:温度25±1℃,光照强度1000-2000Lx,光照时间 12-15h/d。
2.根据权利要求1所述的一种百合的活体保存方法,其特征在于:
所述剥取种球外层鳞片,包括以下步骤:
取洁净无病斑的百合外层鳞片,并用水冲洗干净;
将百合外层鳞片用洗洁精溶液浸洗10-25min;
浸洗结束后将百合外层鳞片用水冲洗3-5h。
3.根据权利要求1所述的一种百合的活体保存方法,其特征在于:所述外植体用75%的酒精浸泡1min,然后用无菌水冲洗5次,再用0.1%HgCl2溶液浸泡20min,随后用无菌水冲洗5次,每次冲洗3min。
4.根据权利要求1所述的一种百合的活体保存方法,其特征在于:
所述保存培养基为:
改良MS+肌醇0.2g/L+甘露醇500mg/L+硝酸银0.5mg/L
改良MS配方为:大量元素含量减少50%,其余成分不变;
所述光照强度为1500Lx;所述光照时间为13h/d。
5.根据权利要求2所述的一种百合的活体保存方法,其特征在于:
所述洗洁精溶液是由洗洁精和水以质量比为1:10配制而成;所述百合外层鳞片用洗洁精溶液浸洗20min,浸洗结束后用水冲洗4h。
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