[发明专利]一种高免疫活性酵母细胞壁多糖的提取方法

权利要求书

1.一种高免疫活性酵母细胞壁多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、啤酒酵母预处理：将啤酒酵母与水按照质量体积比为1:(10～20)的比例混合，充分搅拌均匀，4000r/min离心5～10min，反复洗涤，经100目筛过滤，去除可见杂质，后加入与水等体积的5％酒石酸溶液，搅拌静置除味，4000r/min离心5～10min，得到啤酒酵母预处理物；

S2、冻融法破壁：将预处理的啤酒酵母泥置于-20℃下冷冻1～2h，再置于80℃水中骤然升温使其融化，后4000r/min离心5～10min，如此反复3次，得沉淀物；

S3、酶解：将S2所得的沉淀物与蒸馏水按1:(10～15)的体积混合，用盐酸调pH值为6～8，加入蛋白酶、多糖酶、复配促进剂，进行超声波处理，将混合物5000r/min离心5～10min，收集上清液；

S4、洗涤干燥：上清液用1～2倍体积的质量浓度为60％～85％乙醇沉淀，沉淀物丙酮洗涤两次，真空干燥至恒重即得酵母细胞壁多糖干品；

所述步骤S3多糖酶包括2.5～5‰甘露聚糖酶、0.2～1‰葡聚糖酶、0.2～1‰纤维素酶，所占比例按照啤酒酵母干料质量比计算；

所述复配促进剂为葡萄糖酸锰和葡萄糖酸钴，其质量比为(4～5):1；

所述复配促进剂的质量为蛋白酶的5～10％。

2.根据权利要求1所述的一种高免疫活性酵母细胞壁多糖的提取方法，其特征在于，所述步骤S3中超声波处理的条件为温度45℃，超声波功率50W，时间4S，间歇5S，超声时间30min。

3.根据权利要求1所述的一种高免疫活性酵母细胞壁多糖的提取方法，其特征在于，所述蛋白酶包括无花果蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的一种高免疫活性酵母细胞壁多糖的提取方法，其特征在于，所述蛋白酶加入量为啤酒酵母干料的0.1～0.5％。