[发明专利]一种基于剪切力响应的载药纳米胶束的制备方法

权利要求书

1.一种基于剪切力响应的载药纳米胶束的制备方法，具有以下步骤：

1)PGED-PPS的制备

无水无氧状态下，在圆底烧瓶中加入氯化亚铜和2,2'-联吡啶，络合10分钟后再加入甲基丙烯酸缩水甘油酯、N,N-二甲基甲酰胺和2-溴代异丁酸乙酯；按质量比，氯化亚铜:2,2'-联吡啶:甲基丙烯酸缩水甘油酯:N,N-二甲基甲酰胺:2-溴代异丁酸乙酯＝1:0.5～2:500～1500:500～2000:10～30，全部加入后于50℃下反应3～8h，反应结束后，将反应物溶于氯仿中，过中性氧化铝柱子，收集滤液，旋蒸浓缩液体后于甲醇中沉淀，反复纯化后置于真空烘箱干燥30～50h，得到白色粉状产物PGMA；

在氮气氛围下按质量比1:5～20:10～20将上述制得的PGMA、二甲基亚砜和乙二胺加入圆底烧瓶，80℃下搅拌3～6h后，用反应液的40～80倍蒸馏水稀释反应液，然后用透析膜透析30～50h，最后将透析液冻干24～36h，得到白色固体产物PGED；

将PGED与二甲基亚砜加入圆底烧瓶，冷却至0℃后，加入4-二甲氨基吡啶、吡啶和4-甲苯磺酰氯；按质量比，PGED:二甲基亚砜:4-二甲氨基吡啶:吡啶:4-甲苯磺酰氯＝50:200～1000:1～3:2～5:20～100；室温下搅拌10～20h，反应结束后用透析膜透析30～50h，透析结束后通过冻干得浅黄色固体PGED-Ts；

将PGED-Ts溶于二甲基亚砜中，然后加入三乙胺和硫代乙酸钾；按质量比，PGED-Ts:二甲基亚砜:三乙胺:硫代乙酸钾＝2:5～20:5～15:1～5；室温下反应5～15h，然后用透析袋透析30～50h，透析结束后通过冻干得淡黄色固体PGED-硫代乙酸酯；

将PGED-硫代乙酸酯溶解在体积比1:1～5的THF和甲醇混合液中，加入乙醇钠室温下搅拌0.5～1.5h，冷却至0℃后加入硫化丙烯，其中PGED-硫代乙酸酯、甲醇钠和硫化丙烯的质量比为10:1～5:10～40，0.5～1h后恢复室温继续搅拌8～15h，随后用去离子水透析30～50h，然后冷冻干燥得到PGED-PPS；

2)载药纳米胶束的制备

将PGED-PPS和抗血栓药物完全溶解在DMF中，混合液在超声处理下滴加到冷的去离子水中，其中PGED-PPS、抗血栓药物、DMF和水的质量比为10:1～4:1000～3000:5000～15000，滴加完毕后用去离子水透析1～3d，以获得载药胶束溶液；

3)剪切力响应的载药纳米胶束的制备

首先提取红细胞，将动物的新鲜全血样品以1000～2000r/min离心10～30min，除去血浆，白细胞，血小板和缓冲液，并将剩余的红细胞用PBS洗涤，直到在上清液中观察不到血浆的痕迹，最后，将红细胞重新悬浮在PBS中，将步骤2)制备的载药胶束溶液添加到重悬的红细胞中，并在室温下孵育1～3h后离心洗涤，得到剪切力响应的载药纳米胶束；其中红细胞和所述的载药胶束的体积比为1～3:1。

2.根据权利要求1所述的一种基于剪切力响应的载药纳米胶束的制备方法，其特征在于，步骤2)中所述的抗血栓药物是辛伐他汀。