[发明专利]一种酶法富集n-3多不饱和脂肪酸的方法

说明书

本发明公开了一种酶法富集n‑3多不饱和脂肪酸的方法，属于油脂深加工领域。本发明方法包括，取油脂、水(醇)溶液、脂肪酶于反应器中进行反应，其中，所述脂肪酶包括来源于Candida cylindracea的一种或几种脂肪酶和脂肪酶Candida antarctica lipase A，且脂肪酶的加入顺序不定。目前可用于酶法催化水解或醇解富集PUFA反应得到的甘油酯中饱和和单不饱和脂肪酸的含量依然较高；本发明选用两种不同来源的脂肪酶分别在水解或醇解饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸方面具有专一性，更进一步降低甘油酯产物中非PUFA的脂肪酸含量，从而得到更高含量PUFA的甘油酯产品。

技术领域

本发明涉及一种酶法富集n-3多不饱和脂肪酸的方法，属于油脂深加工领域。

背景技术

多不饱和脂肪酸酸(PUFA)对人体具有重要的生物学意义，特别是n-3PUFA，在国际上广为报道。其中二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，能够显著地防治心血管疾病，辅助炎症修复，促进婴幼儿感官器官的正常发育，被广泛地应用于保健食品和药品中。

市面上的n-3PUFAs产品主要有乙酯型、甘油酯型和游离脂肪酸型三种形式，甘油酯型中n-3PUFAs的含量相对较低，在30％左右，不能满足人们的保健及药用需求。乙酯型和游离脂肪酸型中n-3PUFAs含量可以达到90％，但乙酯型鱼油在人体中消化和吸收都较为困难，而游离脂肪酸型稳定性差。因此，浓缩成高PUFA含量的甘油酯型是最佳的选择。

脂肪酶是油脂工业中常用的生物催化剂，常用于催化油脂的水解和特殊脂质的合成。已经报道出的市面上的脂肪酶多为催化水解、酯化或者酯交换这种催化化学反应的酶，但是现有技术中酶法富集n-3PUFAs主要通过酶法酯化合成n-3PUFAs乙酯和甘油酯型，脂肪酶催化酯化法成本较高，且过程中PUFA的损失很高。水解和醇解是近几年被提倡的绿色、安全的方法，但是因脂肪酶选择性的研究不够深入，得到的PUFA的甘油酯产物中PUFA的含量不够高。同时，对于具有脂肪酸选择性的脂肪酶的发现和报道较少，对于具有明确的某类脂肪酸选择性(比如偏向选择性水解饱和脂肪酸或者单不饱和脂肪酸)的报道更是微乎其微。因此，本领域亟需发现一种或者多种选择性较好的脂肪酶应用于富集PUFA。

发明内容

鉴于上述和/或现有酶法富集多不饱和脂肪酸的方法中存在的用于富集n-3多不饱和脂肪酸脂肪酸的脂肪酶选择性水解的精度不够高的问题，本发明提供了一种酶法富集多不饱和脂肪酸的方法，本发明以来源于Candida cylindracea的脂肪酶和脂肪酶Candidaantarcticalipase A对油脂进行催化酯化，通过本发明的方法，能够将油脂中饱和和单不饱和的脂肪酸含量之和降低到20％以内。对于酶法富集油脂中多不饱和脂肪酸甘油酯的工业化提供了重要技术支撑。

为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：

一种酶法富集n-3多不饱和脂肪酸的方法，所述方法包括，取油脂、水(醇)溶液、脂肪酶于反应器中进行反应，其中，所述脂肪酶包括来源于Candida cylindracea的一种或几种脂肪酶和脂肪酶Candida antarctica lipase A，且脂肪酶的加入顺序不定。

在一种实施方式中，所述方法具体包括：

①取油脂、水溶液、脂肪酶Candida cylindracea和脂肪酶Candidaantarcticalipase A同时置于反应器中进行反应，反应一定的时间后，得混合物，经过纯化后，即可得到富含n-3多不饱和脂肪酸的甘油酯；

或，

②取油脂、水溶液、脂肪酶Candida cylindracea于反应器中进行反应，反应一定的时间后，得混合物，脱除混合物中的游离脂肪酸，即可得到甘油酯；然后将取得到的甘油酯、水(醇)溶液、脂肪酶Candida antarcticalipase A于反应器中进行反应，反应一定的时间后，得混合物，经过纯化后，即可得到富含n-3多不饱和脂肪酸的甘油酯；